用於(yu) 包被固相載體(ti) 的抗原按其來源不同可分為(wei) 天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原三大類。天然抗原可取自動物組織、微生物培養(yang) 物等,須經提取純化才能作包被用。如HBsAg可以從(cong) 攜帶者的血清中提取,一般的細菌和病毒抗原可以從(cong) 其培養(yang) 物中提取,蛋白成份抗原可從(cong) 富含此抗原的材料中提取等(例如AFP從(cong) 臍帶血或胎肝中提取)。重組抗原是抗原基因在質粒體(ti) 中表達的蛋白質抗原,多以大腸杆菌或酵母菌為(wei) 質粒體(ti) 。重組抗原的優(you) 點是除工程菌成份外,其他雜質少,而且無傳(chuan) 染性,但純化技術難度較大。以大腸杆菌為(wei) 質粒體(ti) 的重組抗原如不能充分除大腸杆菌成份,用於(yu) Elisa,在反應中可出現假陽性,因不少受檢者受大腸杆菌感染而在血清中存在抗大腸杆菌抗體(ti) 。重組抗原的另一特點是能用基因工程製備某些無法從(cong) 天然材料中分離的抗原物質。 例如丙型肝炎病毒(HCV)尚不能培養(yang) 成功,而且丙肝病人血清中HCV抗原含量極微。目前檢測抗HCV Elisa中所用包被抗原大多為(wei) 根據HCV的基因克隆表達而製備的重組抗原。在傳(chuan) 染病診斷中,不少重組抗原如HBsAg、HBeAg和HIV抗原等均在Elisa中取得應用。合成多肽抗原是根據蛋白質抗原分子的某一抗原決(jue) 定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。多肽抗原一般隻含有一個(ge) 抗原決(jue) 定簇,純度高,特異性也高,但由於(yu) 分子量太小,往往難於(yu) 直接吸附於(yu) 固相上。多肽抗原的包被一般需先使其與(yu) 無關(guan) 蛋白質如牛血清白蛋白質(BSA)等偶聯,借助於(yu) 偶聯物與(yu) 固相載體(ti) 的吸附,間接地結合到固相載體(ti) 表麵。應用多肽抗原的另一注意點為(wei) 他僅(jin) 能檢測與(yu) 其相應的抗體(ti) 。一種蛋白質抗原往往含有多個(ge) 不同的能引起抗體(ti) 產(chan) 生的決(jue) 定簇,因此在受檢血清中的其他抗體(ti) 就不能與(yu) 該多肽抗原發生反應。另外,某些微生物發生變異時往往發生抗原結構變化,在這種情況下,用個(ge) 別多肽抗原進行包被可引起其他抗體(ti) 的漏檢。