實驗方法操作標準,試劑準備
在臨(lin) 床實驗室,對試劑準備一般不太注意,通常的做法是,在實驗時將試劑從(cong) 冰箱中拿出來即用,而忽略了這種做法有可能影響後麵溫育時間不夠的問題,其直接的後果是對一些弱陽性標本的檢測出現假陰性。因此在ELISA測定中試劑的準備zui為(wei) 關(guan) 鍵的是,在實驗開始前,將試劑盒先從(cong) 冰箱中拿出來,在室溫下放置20分鍾以上後,再進行測定,以使試劑盒在使用前與(yu) 室溫平衡。這樣做的目的,主要是為(wei) 了在後麵的溫育反應步驟中,能使反應微孔內(nei) 的溫度能較快地達到所要求的高度,以滿足測定要求。其次,目前的商品xl18luck新利中的洗板液均需在實驗室使用時對所提供的濃縮液稀釋配製,因此稀釋時所用的蒸餾水或去離子水應保證質量。此外,當試劑盒以OPD為(wei) 底物時,則底物溶液應在反應顯色前臨(lin) 時配製。
Elisa實驗方法操作標準,加血清樣本及反應試劑
在現在的ELISA商品試劑盒中,血清樣本的加入幾乎是*的要使用微量加樣器加入樣本的步驟。使用微量加樣器加樣必須注意的關(guan) 鍵點是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chan) 生氣泡。加樣太快,無法保證微量加樣的準確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區,易導致非特異吸附。濺出會(hui) 對鄰近孔產(chan) 生汙染。出現氣泡則反應液界麵有差異。試劑的加入在國產(chan) 試劑盒中基本上均是從(cong) 滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出現重複滴加或加在兩(liang) 孔之間的現象,這樣就會(hui) 在孔內(nei) 的非包被區出現非特異吸附,從(cong) 而引起非特異顯色。所以,有時候一份標本用相同的試劑盒這次測定為(wei) 陽性,下次測定為(wei) 陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致。