不僅(jin) 適用於(yu) 臨(lin) 床標本的檢查，而且由於(yu) 一天之內(nei) 可以檢查幾百甚至上千份標本,因此，也適合於(yu) 血清流行病學調查。ELISA法是免疫診斷中的一項新技術，現已成功地應用於(yu) 多種病原微生物所引起的傳(chuan) 染病、寄生蟲病及非傳(chuan) 染病等方麵的免疫診斷。也已應用於(yu) 大分子抗原和小分子抗原的定量測定，根據已經使用的結果，本法不僅(jin) 可以用來測定抗體(ti) ，而且也可用於(yu) 測定體(ti) 液中的循環抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫學各領域的應用範圍日益擴大，可概括四個(ge) 方麵：
1、免疫酶染色各種細胞內(nei) 成份的定位。
2、研究抗酶抗體(ti) 的合成。
3、顯現微量的免疫沉澱反應。
4、定量檢測體(ti) 液中抗原或抗體(ti) 成份。
 
操作流程如下：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個(ge) 平行孔；設兩(liang) 個(ge) 陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個(ge) 空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 （2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸幹孔內(nei) 反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔後，即甩去），之後將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鍾，間歇搖動。甩去孔內(nei) 液體(ti) 後在吸水紙上拍幹。重複洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1：500稀釋的兔抗人AIF抗體(ti) 工作液50μl。
（5）酶標板置37℃培養(yang) 箱的濕盒內(nei) ，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1：5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體(ti) 工作液 100μl。
（8）酶標板置37℃培養(yang) 箱的濕盒內(nei) ，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui終測得的OD值為(wei) 兩(liang) 者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光幹擾。
（13）數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值後，計算S/N值。S/N≥2.1為(wei) 陽性判定標準。