一.用途
ELISA的基礎是抗原或抗體(ti) 的固相化及抗原或抗體(ti) 的酶標記。結合在固相載體(ti) 表麵的抗原或抗體(ti) 仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體(ti) 既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體(ti) 或抗原)與(yu) 固相載體(ti) 表麵的抗原或抗體(ti) 起反應。用洗滌的方法使固相載體(ti) 上形成的抗原抗體(ti) 複合物與(yu) 液體(ti) 中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體(ti) ,也通過反應而結合在固相載體(ti) 上。
此時固相上的酶量與(yu) 標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物後,底物被酶催化成為(wei) 有色產(chan) 物,產(chan) 物的量與(yu) 標本中受檢物質的量直接相關(guan) ,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。
由於(yu) 酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用於(yu) 測定抗原,也可用於(yu) 測定抗體(ti) 。然而,影響Elisa試驗結果的因素很多,故加強各個(ge) 環節的質量保證才能充分發揮其方法學的優(you) 點。
二.優(you) 勢
1、、靈敏、特異的抗體(ti) ;
2、穩定的重複性和可靠性;
3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體(ti) ;
4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yang) 上清液、尿液等等多種標本類型;
5、節省實驗經費。
回收率是反應待測物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標液1PPM,就是1毫克/升,而作出標準數據為(wei) 0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個(ge) 與(yu) 真實成分有密切的關(guan) 係,說明方法的準確度。比如水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為(wei) 10mg/mL的含無機氯標準樣品,測定時忽略體(ti) 積變化,如果測定出樣品中無機氯為(wei) 2.98mg/L,則認為(wei) 回收率為(wei) 99%。