實驗稀釋血清的步驟:
先把蛋白稀釋一定的倍數,比如說10倍、20倍稀釋(這樣可以大體(ti) 確定一個(ge) 參數),將抗原進行一係列稀釋包被微量反應板,再用一定稀釋度的陽性參考血清和陰性參考血清進行孵育後洗滌,再加酶結合物進行反應,經孵育洗滌後,加底物溶液顯色,終止反應後分別測定O.D值,選擇O.D值≥1.0的那個(ge) 抗原稀釋度為(wei) zui適包被濃度。一般總是要選擇那個(ge) O.D值稍大於(yu) 1.0,而不選擇小於(yu) 1.0的抗原濃度。陰性參考血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽性參考血清和陰性參考血清的O.D值有明顯差別。
在xl18luck新利實驗血清為(wei) 什麽(me) 要稀釋?有兩(liang) 個(ge) 原因:
1)競爭(zheng) 抑製比較明顯,應稀釋競爭(zheng) 物;
2)血清中含有的性腺激素比較低,應該濃縮才對。
血清稀釋用普通的PBS即可,可加1%的BSA,能有效降低ELISA本底,當然如果你嫌麻煩我覺得用生理鹽水替代PBS關(guan) 係也不大。不管你是用直接競爭(zheng) 還是間接競爭(zheng) ,血清的稀釋倍數肯定要事先確定,但也不用一點點,你做一個(ge) 預試驗即可,選擇OD在1.0左右的稀釋倍數,即你的競爭(zheng) 中陰性孔OD在1.0,這樣作出來的曲線比較敏感。
250 Kligler Iron Agar 用於(yu) 細菌複合生化試驗(葡萄糖,乳糖) 克氏雙糖鐵瓊脂
250 Blood Agar Base N0.2 供分離營養(yang) 要求非常高的致病菌用,後加血液製成血平板 血瓊脂基礎2號
250 Blood Agar Base 供分離營養(yang) 要求較高的致病菌用,後加血液製成血平板 血液瓊脂基礎
250 Blood Enrichment Medium 用於(yu) 從(cong) 血液中分離病原菌 血液增菌培養(yang) 基
250 TTC-Sabourand’s Medium 用於(yu) 分離真菌,酵母菌等 氯化三苯四氮唑-沙保羅培養(yang) 基
250 Maconkey Agar 用於(yu) 腸道致病菌的選擇性分離、培養(yang) (OXOID方法) 麥康凱瓊脂
250 Maconkey Agar(without salt) 用於(yu) 腸道致病菌的選擇性分離、培養(yang) (OXOID方法) 麥康凱瓊脂(不含鹽)
250 Maconkey Agar No.2 用於(yu) 腸道致病菌的選擇性分離、培養(yang) (OXOID方法) 麥康凱瓊脂2號
250 Maconkey Agar No.3 用於(yu) 腸道致病菌的選擇性分離、培養(yang) (OXOID方法) 麥康凱瓊脂3號
250 Alkaline Agar 用於(yu) 分離霍亂(luan) 弧菌 堿性瓊脂平板
250 Alkaline Bile Salt Agar 用於(yu) 分離霍亂(luan) 弧菌 堿性膽鹽瓊脂