在檢測實驗中，zui讓大家關(guan) 注的往往是一些操作技巧、步驟、保存、注意事項，其實隻要這些方麵做好了之後基本就沒有什麽(me) 問題了。但是也有客戶反映，為(wei) 什麽(me) 我每一步都按照要求去做還是沒有做好呢？這就很可能是操作細節的問題了。大家整理出一份ELISA實驗的細節優(you) 化方案，這些ELISA優(you) 化是否在您的重點思慮範圍之內(nei) 呢？

一、包被原的性質

    1.親(qin) 和素生物素：先親(qin) 和素先包被載體(ti) ，加入生物素化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴大應用於(yu) 各種抗原物質的定量測定。

    2.脂類物質：可將其在有機溶劑中溶解後加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風吹幹，待酒精揮發後，讓脂質自然幹固在固相表麵。

    3.小分子必須依靠和大的蛋白載體(ti) 偶聯後才能固定在固相載體(ti) 上。
 

二、包被液的選擇

    一般選擇ph9.6的碳酸鹽緩衝(chong) 液。但有時由於(yu) 試驗的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的緩衝(chong) 溶液來包。上海恒遠提醒應當注意，由於(yu) 蛋白質與(yu) 聚苯乙烯固相載體(ti) 是通過物理吸附結合的，靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與(yu) 固相載體(ti) 表麵的疏水基團間的作用，這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質的分子量、等電點、濃度等的影響，大分子蛋白質較小分子蛋白質通常含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體(ti) 表麵。具體(ti) 的試驗還要有堅固的理論外也要實踐，看一下zui終可不可以應用到自己試驗當中去。常用的包被液除了剛才提到的pH9.6碳酸鹽緩衝(chong) 液，還有pH7.2的磷酸鹽緩衝(chong) 液和pH7-8的Tris-HCL緩衝(chong) 液等等。