實驗操作步驟多,新手操作難免會(hui) 有過失。而這些過失很多是由細節不夠好造成的,減少過失的方法有很多,比如做實驗時少說話,防止唾液掉進酶標條中。當然,大家還要學會(hui) 自己發掘問題,找出原因。那麽(me) 我們(men) 要如何完善elisa試劑盒實驗中的過失?
1:評估試劑的實用性,試劑的穩定與(yu) 否,對準確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應進行陰、陽對照及樣品反複比照試驗,判定試劑符合要求後方可使用。
2:操作前仔細閱讀說明書(shu) ,嚴(yan) 格按照說明書(shu) 要求進行規範化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改進的地方,反複試驗確定成立後才能改進,比如洗板次數的掌握等。
3:加樣要準確、快速。加樣不準確,酶生成物的量不能確定,直接影響顯色結果。另外,顯色的深淺及A值的測定與(yu) 加入顯色劑和終止液的量有關(guan) ,所以加樣應慎重。要求在一定時間內(nei) 加樣完畢的實驗,如果加樣遲緩,便出現誤差,而且試劑長時間暴露在外,尤其室溫過高時,保存期會(hui) 縮短甚至失效。
4:檢驗技師應具備從(cong) 事實驗室操作的基本素質和實踐經驗。能熟練操作實驗儀(yi) 器、器械,具有一定總結和分析問題的能力,對實驗中出現的意外情況能及時妥善解決(jue) 。
5:洗滌*,洗板不*,酶結合物本底顯色會(hui) 呈現假陽性。另外,洗滌液要新鮮,現用現配,陳舊的洗滌液會(hui) 出現本底增高現象,也可能出現假陽性。
6:嚴(yan) 控反應時間。反應時間過長,酶失活;反應時間過短,酶結合物不能與(yu) 血清中的微生物抗原抗體(ti) 充分結合,生成物結構鬆散不牢固,容易洗掉,都可能造成假陰性。