在實驗中,酶標板是所需設備,有著重要作用。今天上海恒遠為(wei) 您解析ELISA酶標板的三大分類,根據酶標板與(yu) 蛋白和其它分子結合能力的不同,可以分為(wei) :
一、氨基化
這種酶標板經表麵改性處理後擁有帶正電荷的氨基,其疏水鍵由親(qin) 水鍵取代。該類酶標板適合作為(wei) 小分子蛋白的固相載體(ti) 。使用合適的緩衝(chong) 液和pH值,其表麵可通過離子鍵與(yu) 帶負電荷的小分子結合。由於(yu) 其表麵的親(qin) 水特性和可通過其它交聯劑共價(jia) 結合的能力,可用於(yu) 固定溶於(yu) Triton-100、Tween 20等去汙劑的蛋白分子。該類板的缺陷為(wei) 由於(yu) 降低了疏水性,一部分蛋白分子無法結合;此外,其表麵需有效地封閉。由於(yu) 親(qin) 水和共價(jia) 的表麵特性,使用的封閉液必須能夠與(yu) 非反應性氨基基團和所選擇的交聯劑中任何功能基團發生作用。
二、中結合力
此類酶標板經表麵疏水鍵被動與(yu) 蛋白結合,適合作為(wei) 分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體(ti) ,其蛋白結合能力為(wei) 200~300ng IgG/cm2。由於(yu) 該類酶標板所具有的僅(jin) 與(yu) 大分子結合的特性,適用於(yu) 作為(wei) 未純化抗體(ti) 或抗原的固相載體(ti) ,可降低潛在的非特異性交叉反應。該類板可以惰性蛋白或非離子去汙劑作為(wei) 封閉液。
三、高結合力
此種酶標板,表麵經處理後,其蛋白結合能力大大增強,可達300~400ng IgG/cm2,主要結合的蛋白分子量>10kD。使用該類酶標板可提高敏感性,並可相對減少包被蛋白的濃度和用量,不足之處為(wei) 較易產(chan) 生非特異性反應。抗原或抗體(ti) 包被後,以非離子去汙劑無法有效地封閉未結合蛋白的部位,需使用蛋白作為(wei) 封閉劑。