途徑的選擇決(jue) 定於(yu) 抗原的生物學特性和理化特性,如激素、酶、毒素等生物學活性抗原,通常不宜選用靜脈打針。
不一樣個(ge) 別對共同抗原的反應性不一樣,而且不一樣抗原發作免疫反應的能力也有強有弱,因此常常在打針抗原的一起,參與(yu) 能增強抗原的抗原性物質,以影響機體(ti) 發作較強的免疫反應,這種物質稱為(wei) 免疫佐劑。
免疫前取等容積*或不*佐劑與(yu) 免疫原溶液混合,用振蕩器混勻成乳狀,也可以在免疫前取需求量佐劑置乳缽中研磨,均勻後再邊磨邊滴參與(yu) 等容積抗原液(其中加卡介苗3~4mg/ml或不加),加完後再繼承研磨成乳劑,滴於(yu) 冰水上5~10min內(nei) *不分散停止。
交叉反應率低,標明抗血清的特異性好,反之則特異性差。
收集的血液置於(yu) 室溫下1h支配,凝聚後,置4℃下,過夜(切勿冰凍)分出血清,離心,4000rpm,10min。
取兔血有兩(liang) 種方法,一是耳緣靜脈或耳動脈放血,二是頸動脈入血,也可心髒采血。加強免疫時用不*佐劑,初度免疫時皮下打針百日咳疫苗0.5ml,加強免疫時不必打針百日咳疫苗。
在無菌條件,吸出血清,分裝(0.05~0.2ml),貯於(yu) -40℃以下冰箱,或凍幹後儲(chu) 存。
取動脈或靜脈放血時,將兔放入一個(ge) 特造的木匣或籠內(nei) ,耳露於(yu) 箱(籠)外,也可由另一人捉住兔身。
避免丟(diu) 掉抗原,亦可用一打針器裝抗原液,另一打針器裝佐劑,二者以聚乙烯塑料管聯接,然後二者往複重複抽吸,約數十分鍾後即能*乳化。
每2~3周加強免疫一次。
製作方法:按比例將羊毛脂與(yu) 石蠟油置容器內(nei) ,用超聲波使之混勻,高壓滅菌,置4℃下保留備用。
xl18luck新利特異性是以交叉反應率來標明的。
交叉反應率通常是用比賽抑製曲線來判定的。
若用兔,用純種新西蘭(lan) 兔,一組三隻,兔的體(ti) 重以2~3kg為(wei) 宜。
家兔是zui常用以發作抗體(ti) 的動物,因此這兒(er) 首要談論兔血的收集。
頸動脈放血時,將兔仰臥,固定於(yu) 兔台,剪去頸部的毛,切開皮膚,顯露頸動脈,插管,放血。
不一樣濃度的抗原和近似抗原物質分別做比賽抑製曲線,計算各自的聯絡率(B/T或B/B0),求出各清閑IC50時的濃度,按下列公式計算交叉反應率。二禮拜後,可在另一耳放血。
此法可重複屢次放血。
作免疫用的動物有哺乳類和禽類,首要為(wei) 羊、馬、家兔、猴、豬、豚鼠、雞等,實驗室常用者為(wei) 家兔、山羊和豚鼠等。
在第2次加強免疫後2周,從(cong) 耳緣靜脈取2~3ml血,製備血清,檢查抗體(ti) 效價(jia) 。羊等較大動物以頸靜脈、動脈取血,鼠等小動物取血可參看有關(guan) 材料。
剪去耳緣的毛,用少數二甲苯塗改耳廓,30s後,耳血管擴大、充血。用手輕拉耳尖,以單麵剃須刀或尖的手術刀片,敏捷切開動脈或靜脈,血液即流出,每次可收集30~40ml。
抗原劑量,初度劑量為(wei) 300~500μg,加強免疫的劑量約為(wei) 初度劑量為(wei) 1/4支配。
C冰箱保留。檢查合格後即以其中一打針器作打針用。
佐劑除了延伸抗原在體(ti) 內(nei) 的存留時間,添加抗原影響效果外,更首要的是,它能影響網狀內(nei) 皮係統,使介入免疫反應的免疫活性細胞增多,推進T細胞與(yu) B細胞的相互效果,然後增強機體(ti) 對抗原的細胞免疫和抗體(ti) 的發作。
xl18luck新利未抵達預期效價(jia) ,需再進行加強免疫,直到滿足時停止。