一、問：用HPLC進行分析時保留時間有時發生漂移，有時發生快速變化，原因何在？如何解決(jue) ？

　　答：關(guan) 於(yu) 漂移問題：

　　1.溫度控製不好，解決(jue) 方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定

　　2.流動相發生變化，解決(jue) 辦法是防止流動相發生蒸發、反應等

　　3.柱子未平衡好，需對柱子進行更長時間的平衡

　　關(guan) 於(yu) 快速變化問題

　　1.流速發生變化，解決(jue) 辦法是重新設定流速，使之保持穩定

　　2.泵中有氣泡，可通過排氣等操作將氣泡趕出。

　　3.流動相不合適，解決(jue) 辦法為(wei) 改換流動相或使流動相在控製室內(nei) 進行適當混合

　　二、問：液相色譜中峰出現拖尾或出現雙峰的原因是什麽(me) ？

　　答：1.篩板堵塞或柱失效，解決(jue) 辦法是反向衝(chong) 洗柱子，替換篩板或更換柱子。

　　2.存在幹擾峰，解決(jue) 辦法為(wei) 使用較長的柱子，改換流動相或更換選擇性好的柱子

　　三、問：HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決(jue) 辦法

　　答：1.樣品量不足，解決(jue) 辦法為(wei) 增加樣品量 醫.學教育網搜集整理

　　2.樣品未從(cong) 柱子中流出。可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子

　　3.樣品與(yu) 檢測器不匹配。根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器

　　4.檢測器衰減太多。調整衰減即可。

　　5.檢測器時間常數太大。解決(jue) 辦法為(wei) 降低時間參數

　　6.檢測器池窗汙染。解決(jue) 辦法為(wei) 清洗池窗。

　　7.檢測池中有氣泡。解決(jue) 辦法為(wei) 排氣。

　　8.記錄儀(yi) 測壓範圍不當。調整電壓範圍即可。

　　9.流動相流量不合適。調整流速即可。

　　10.檢測器與(yu) 記錄儀(yi) 超出校正曲線。解決(jue) 辦法為(wei) 檢查記錄儀(yi) 與(yu) 檢測器，重作校正曲線。

　　四、問：做HPLC分析時，柱壓不穩定，原因何在？如何解決(jue) ？

　　答：原因可能有：

　　1.泵內(nei) 有空氣，解決(jue) 的辦法是清除泵內(nei) 空氣，對溶劑進行脫氣處理；

　　2.比例閥失效，更換比例閥即可；

　　3.泵密封墊損壞，更換密封墊即可；

　　4.溶劑中的氣泡，解決(jue) 的辦法是對溶劑脫氣，必要時改變脫氣方法；

　　5.係統檢漏，找出漏點，密封即可；

　　6.梯度洗脫，這時壓力波動是正常的。

　　五、問：我購買(mai) 的HPLC柱驗收測試時柱壓過高，請問為(wei) 什麽(me) ？

　　答：柱壓過高是HPLC柱用戶zui常碰到的問題。其原因有多方麵，而且常常並不是柱子本身的問題，您可按下麵步驟檢查問題的起因。 醫學教|育網搜集整理

　　1.拆去保護預柱，看柱壓是否還高，否則是保護柱的問題，若柱壓仍高，再檢查；

　　2.把色譜柱從(cong) 儀(yi) 器上取下，看壓力是否下降，否則是管路堵塞，需清洗，若壓力下降，再檢查；

　　3.將柱子的進出口反過來接在儀(yi) 器上，用10倍柱體(ti) 積的流動相衝(chong) 洗柱子，（此時不要連接檢測器，以防固體(ti) 顆粒進入流動池）。這時，如果柱壓仍不下降，再檢查；

　　4.更換柱子入口篩板，若柱壓下降，說明您的溶劑或樣品含有顆粒雜質，正是這些雜質將篩板堵塞引起壓力上升。若柱壓還高，請與(yu) 。一般情況下，在進樣器與(yu) 保護柱之間接一個(ge) 在線過濾器便可避免柱壓過高的問題，SGE提供的Rheodyne7315型過濾器就是解決(jue) 這一問題的*選擇。