ELISA實驗過程中各種樣本不同的處理方法

在收集樣本前都必須有一個(ge) 完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集後當天就進行檢測的樣本，及時儲(chu) 存在4℃備用。對於(yu) 隔天再檢測的樣本，及時分裝後凍存在-20℃備用，有條件的，-70℃凍存備用。標本應避免反複凍融。 液體(ti) 類標本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yang) 上清等。
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鍾，離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存     過程中如出現沉澱，應再次離心。
2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為(wei) 抗凝劑，混合10-20分鍾後，離心20分鍾     左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉澱形成，應該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉澱    形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4. 細胞培養(yang) 上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細    收集上清。
5. 培養(yang) 細胞：檢測細胞內(nei) 的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬(wan) /ml左      右。通過反複凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞並放出細胞內(nei) 成份。離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成，應再次離心。
6. 組織標本：切割標本後，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融    化後仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑，用手工或勻漿器    將標本勻漿化。離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝後一份待檢測，其餘(yu) 冷     凍備用。
7. 標本采集後盡早進行提取，提取按相關(guan) 文獻進行，提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進
    行試驗，可將標本放於(yu) -20℃保存，但應避免反複凍融.
8. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑製辣根過氧化物酶的（HRP）活性。