樣本處理及要求

1.  血清：全血標本請於(yu) 室溫放置2小時或4℃過夜後於(yu) 1000g離心20分鍾，取上清即可檢測，或將標本放於(yu) -20℃或-80℃保存，但應避免反複凍融。
2.  血漿：可用EDTA或肝素作為(wei) 抗凝劑，標本采集後30分鍾內(nei) 於(yu) 2 - 8°C 1000g離心20分鍾，或將標本放於(yu) -20℃或-80℃保存，但應避免反複凍融。
3.  細胞培養(yang) 物上清或其它生物標本：1000g離心20分鍾，取上清即可檢測，或將標本放於(yu) -20℃或-80℃保存，但應避免反複凍融。
注：標本溶血會(hui) 影響後檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。

操作步驟

1.  從(cong) 室溫平衡20min後的鋁箔袋中取出所需板條，剩餘(yu) 板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3.  樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體(ti) 100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體(ti) ，吸水紙上拍幹，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍幹，如此重複洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nei) ，在450nm波長處測定各孔的OD值。