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xl18luck新利實驗土壤/植物樣本的處理方法有哪些
更新時間:2019-09-03   點擊次數:1351次

實驗土壤/植物樣本的處理方法

植物標本的精采集及保存 
1、 稱取0.1g(誤差±3%以內(nei) )新鮮植物組織樣本,在液氮中充分研磨;

2、 加入1ml的提取液(80%甲醇), 置於(yu) -20度過夜;

3、 於(yu) 4度,8000rpm,離心1小時,取上清;

4、 上清液過C-18固相萃取柱。具體(ti) 步驟是: 80%甲醇(1ml)平衡柱→上樣→收集樣品→移開樣品後用100%甲醇(5ml)洗柱→100%yimi(5ml)洗柱→100%甲醇(5ml)洗柱→循環。過柱後的樣本真空幹燥或氮氣吹幹,保存備用;

5、 上樣前加入pH7.4 PBS緩衝(chong) 液(1ml定容)。混勻後室溫放置30分鍾,然後4度離心(8000rpm,15分鍾),取上清並暫時保存於(yu) 4度待用。

6.植物標本中相關(guan) 酶或蛋白的測定:(粗提取)

1、 新鮮植物組織請在液氮中充分研磨;

2、 加入樣品體(ti) 積9倍的提取液(pH 7.4 PBS緩衝(chong) 液),3、 請於(yu) 4度,8000rpm,離心30分鍾,取上清並暫時保存於(yu) 4度待用。

土壤:稱取1g土壤,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工將標本充分混勻。2-8℃條件離心20分鍾左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清。分裝一份待檢測,其餘(yu) 冷凍備用,保存過程中如有沉澱形成,應再次離心。如果是測分泌蛋白,直接取上清檢測,測試細胞內(nei) 蛋白,要破碎細胞。

 

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