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人（human）I型膠原C端肽CTX1說明書
更新時間：2011-06-14   點擊次數：1540次

 

本試劑盒僅供研究使用      標本：血清或者血漿
 
一、試 劑 組 成

精密度微孔板96孔
（Microtitration Strips）
1塊
2～8℃幹燥保存
酶標偶合液
（Conjugate ）  
1瓶 12.0毫升
2～8℃冷藏保存
標準品
（Standard）
5瓶 各1.0毫升
2～8℃冷藏保存
呈色劑A
（Substrate A）
1瓶 6.0毫升
2～8℃避光冷藏保存
呈色劑B
（Substrate B）
1瓶 6.0毫升
2～8℃避光冷藏保存
終止液
（Stopping Solution）
1瓶 6.0毫升
室溫保存
20倍濃縮洗滌液
（Rinsing Buffer x 20）
1瓶 60.0毫升
2～8℃冷藏保存
5倍濃縮樣品稀釋液
（Diluent x 5）
1瓶 15.0ml
2～8℃冷藏保存
英文說明書(shu) ，中文說明書(shu)
 
各一份
室溫保存

 
二、注意事項
1.  此試劑為體外檢測試劑，效期內使用，試劑應視為傳染物，不同總批號的試劑不能混用。
2． 使用前應將盒內各試劑取出。室溫放置至少30分鍾，
3． 濃縮洗滌液出現結晶後，請於37℃孵育15分鍾。
4． 濃縮樣品稀釋液出現結晶後，請於37℃孵育15分鍾
5． 若24小時內進行實驗，標本可存放於2～8℃。不需及時實驗，標本-20℃保存，避免反複凍融。
6． 在反複清洗微孔板，並扣幹微孔中的殘餘液體，否則將降低度，造成吸光度偏離的假像。
7． 加樣完畢後，應注意輕微搖動微孔反應條，以便使孔中的液體充分混勻。
8． 試劑盒保存於2～8℃，請勿冷凍，有效期請見盒內標示。
 
三、實驗前準備
1．使用前應將盒內各試劑取出，室溫放置至少30分鍾。
2．準備各種實驗儀器及材料，如微量移液器，吸頭，醫用蒸餾水等
3．濃縮洗液與醫用蒸餾水1︰19倍稀釋後成為應用洗滌液
4．濃縮樣品稀釋液與醫用蒸餾水1︰4倍稀釋成應用樣品稀釋液
5．用應用樣品稀釋液來稀釋樣品，按照1：100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應用樣品稀釋液中，充分混勻待用。）
 
四、操 作 步 驟
1．取出酶標板，設空白孔，依照次序對應分別加入100μl的標準品於空白微孔中（空白孔視為0號標準品，用醫用蒸餾水替代）
2、分別標記樣品編號，加入100μl的稀釋樣品於空白微孔中（不同的樣本采用不同的吸頭）。
3、將酶標板置於37℃溫育30分鍾；
4、將酶標板板取出，將其中的液體甩去，每個孔中全部加滿應用洗滌液後，立即甩去液體;
5、每個孔中加滿應用洗滌液後，輕微振搖酶標板30秒後將孔中的應用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標板拍幹。
6、重複第5個步驟5次，在吸水紙上將酶標板拍幹。
7、在標準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標偶合溶液。
8、將96孔板置於37℃溫育30分鍾。
9、將酶標板取出，將其中的液體甩去，每個孔中全部加滿應用洗滌液後，立即甩去液體。
10、每個孔中再次加滿洗滌應用液後，室溫輕微振搖酶標板30秒後將孔中的應用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標板拍幹。
11、重複第5個步驟5次，在吸水紙上將酶標板拍幹。
12、在每個孔中加入底物A 50μl後立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。（A液、B液采用不同的吸頭加樣）
13、將酶標板置於37℃避光溫育反應15分鍾。
14、每個微孔中加入50μl的終止液，輕輕振蕩混勻。
15、在酶標儀上，450nm處測定OD; 顯色後，15分鍾內進行測定。
16、根據製備的標準曲線，計算樣本含量
 
五、結 果 判 斷
1. 儀器值：於波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值；
2、檢測值範圍：0－12nmol/L
3、敏感度：0.1 nmol/L
 
 

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