技術原理:
DNA的半保留複製是生物進化和傳(chuan) 代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與(yu) 啟動子的參與(yu) 下,根據堿基互補配對原則複製成同樣的兩(liang) 分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低後又可以複性成為(wei) 雙鏈。因此,通過溫度變化控製DNA的變性和複性,並設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體(ti) 外複製。( DNA高溫變性低溫複性)
發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對於(yu) PCR的應用有裏程碑的意義(yi) ,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(ge) 循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,並逐步應用於(yu) 臨(lin) 床。