操作步驟

1.  編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1

孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其餘(yu) 各步操作相同）

2.  加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然後在待測樣品孔先

加樣品稀釋液 40μl，然後再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加於(yu) 酶標板孔底部，盡量不

觸及孔壁，輕輕晃動混勻，

3.  溫育：用封板膜封板後置 37℃溫育 30 分鍾。

4.  配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋後備用

5.  洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體(ti) ，甩幹，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒後棄去，如此

重複 5 次，拍幹。

6.  加酶：每孔加入酶標試劑 50μl，空白孔除外。

7.  溫育：操作同 3。 

8.  洗滌：操作同 5。

9.  顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色

15 分鍾.

10.  終止：每孔加終止液 50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11.  測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。  測定應在加終止

液後 15 分鍾以內(nei) 進行。