PCR反應體(ti) 係被汙染會(hui) 導致PCR結果出現假陽性,需要設置陰性對照來排除。將使用的移液器槍頭浸泡在2× Blood Master Mix中,添加引物,ddH2O進行PCR擴增;另取ddH2O作為(wei) 模板,用目的基因引物進行PCR擴增,以排除PCR體(ti) 係是否被汙染和實驗是否有其他汙染源。
注意事項:
1. 盡量使用新鮮抗凝血。若凍存血,應避免反複凍融。
2. 解凍後2× Blood Master Mix可能出現渾濁,冰上放置1-2 min,待溶液澄清後,上下顛倒混勻,不影響試劑性能。
3. 電泳檢測時,切勿使用含有 SDS 的Loading Buffer,否則在電泳時會(hui) 在泳道中出現一大團拖尾亮帶,影響實驗結果。
4. 建議擴增片段長度1 kb以內(nei) ,以便擴增效率jia。
5. 為(wei) 了您的安全和健康,請穿實驗服並戴一次性手套操作。