簡化的程序列表如下：
1、將一級抗體(ti) （未標記）與(yu) 樣品抗原一起孵育。
2、將抗體(ti) 、抗原複合物添加到預先用相同抗原包被的96孔板中。
3、 通過洗滌板除去未結合的抗體(ti) 。（樣品中的抗原越多，與(yu) 孔中的抗原結合的抗體(ti) 越少，因此稱為(wei) “競爭(zheng) ”。）
4、添加對一抗具有特異性並與(yu) 酶偶聯的二抗。小鼠小扁豆素結合型甲胎蛋白(AFP-L2) ELISA kit生物研究中心 
5、添加底物，剩餘(yu) 的酶引發發色或熒光信號。
6、對於(yu) 競爭(zheng) 性ELISA，樣品抗原濃度越高，終信號越弱。
競爭(zheng) 性ELISA的主要事件是由原始抗原（樣品抗原）和添加抗原執行的競爭(zheng) 性結合過程。與(yu) 間接ELISA，三明治式ELISA和直接ELISA相比，競爭(zheng) 性ELISA的程序在某些方麵有所不同。競爭(zheng) 法的簡要操作步驟：
1）先加入特異性抗原，使抗原固定結合於(yu) 載體(ti) 表麵；
2）加入梯度濃度比例的待測樣品與(yu) 酶標抗體(ti) 混合物，並做隻加酶標抗體(ti) 的對照組；
3）加入酶促反應底物，發生顯色反應，對比實驗組及對照組的顯色差異，計算未知抗體(ti) 的量。