技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 人β澱粉樣蛋白1-40elisa檢測試劑盒實驗操作步驟
人β澱粉樣蛋白1-40elisa檢測試劑盒實驗操作步驟
更新時間:2020-07-22   點擊次數:1254次

操作步驟

1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體(ti) 產(chan) 生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chan) 生加樣上的誤差。
2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決(jue) 定所需的板條數。每個(ge) 標準品和空白孔建議做複孔。每個(ge) 樣品根據自己的數量來定,能使用複孔的盡量做複孔。
3.加入稀釋好後的標準品50ul於(yu) 反應孔、加入待測樣品50ul於(yu) 反應孔內(nei) 。立即加入50ul的生物素標記的抗體(ti) 。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4.甩去孔內(nei) 液體(ti) ,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍幹。重複此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5.每孔加入80ul的親(qin) 和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鍾。
6.甩去孔內(nei) 液體(ti) ,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍幹。重複此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鍾。避免光照。
8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液後應立即測定結果。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值。

試劑盒性能
1. 靈敏度:小的檢測濃度小於(yu) 1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與(yu) 預期濃度相關(guan) 係數R值為(wei) 0.990。
2. 特異性:不與(yu) 人其它細胞因子反應。
3. 重複性:板內(nei) 、板間變異係數均小於(yu) 10%。

結 果 判 斷 與(yu) 分 析
1、儀(yi) 器值:人β澱粉樣蛋白Aβ40於(yu) 波長450nm的酶標儀(yi) 上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為(wei) 縱坐標(Y),相應的Aβ40標準品濃度為(wei) 橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的Aβ40含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值範圍:0-80ng/ml

4、敏感度: 0.1 ng/ml

 

推薦收藏該企業網站