我們(men) 的具有如下優(you) 勢:
一、高效、靈敏、特異的抗體(ti) ;
二、穩定的重複性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體(ti) ;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yang) 上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價(jia) 比非常好,節省實驗經費。
我們(men) 采用的酶: 辣根過氧化酶(HRP)
1. HRP在蔬菜作物辣根中含量很高。
2. 是一種糖蛋白,含糖量約18%;分子量為(wei) 44kD。
3. 是一種複合酶,由主酶(酶蛋白)和輔基(亞(ya) 鐵血紅素)結合 而成的一種卟啉蛋白質。
4. 主酶為(wei) 無色糖蛋白,在275nm波長處有高吸收峰;輔基是深 棕色的含鐵卟啉環,在403nm波長處有高吸收峰。
HRP催化下列反應:
DH2+H2O2<==HRP==>D+2H2O
上式中DH2為(wei) 供氫體(ti) ,H2O2為(wei) 受氫體(ti) 。HRP對受氫體(ti) 的專(zhuan) 一 性很高,除H2O2外,僅(jin) 作用於(yu) 小分子醇的過氧化物和尿素的過 氧化物。後者為(wei) 固體(ti) ,作為(wei) 試劑較H2O2方便。許多化合物可作 為(wei) HRP的供氫體(ti) ,在ELISA中常用的供氫體(ti) 底物為(wei) 鄰苯二胺(orthopenylenediamine,OPD)、四甲基聯苯胺(3,3', 5,5'-tetramethylbenzidine,TMB)和ABTS[2,2'-azino- bis(3-ethyl-benzthiazolinesulfonate-6)]。