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檸檬酸(CA)含量測定樣本的前處理
更新時間:2021-08-26   點擊次數:1051次

樣本的前處理:

組織、細菌或細胞中胞漿蛋白與(yu) 線粒體(ti) 蛋白的分離:

①稱取約0.1g組織或收集500萬(wan) 細菌或細胞,加入1mL試劑一和10uL 試劑三,用冰浴勻漿 器或研缽勻漿。

②將勻漿600g,4℃離心5min。

③棄沉澱,將上清液移至另一離心管中,11000g,4℃離心10min。

④上清液即胞漿提取物,可用於(yu) 測定從(cong) 線粒體(ti) 泄漏的α-KGDH(此步可選做)。

⑤在步驟④的沉澱中加入200uL試劑二和2uL 試劑三,超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W, 超聲3秒,間隔10秒,重複30次),用於(yu) 線粒體(ti) α-KGDH活性測定。

測定原理:α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+ 和輔酶A生成琥珀酰輔酶A、二氧化碳和 NADH,NADH在340 nm有特征吸收峰,以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。自備實驗用品及儀(yi) 器:紫外分光光度計、水浴鍋、台式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

雙特異性酪氨酸磷酸化調節激酶DYRK2抗體(ti)

鋅指結構蛋白酶20抗體(ti)

C型凝集素受體(ti) CLEC13A抗體(ti)

雙甲基精氨酸水解酶2抗體(ti)

D酪氨酸激酶衰減蛋白1抗體(ti)

雙特異性酪氨酸磷酸化調節激酶3抗體(ti)

肌營養(yang) 蛋白α抗體(ti)

多巴胺β羥化酶抗體(ti)

抑癌基因抗體(ti)

DNA甲基轉移酶1抗體(ti)

DNA甲基轉移酶-3α抗體(ti)

DNA甲基轉移酶-3β抗體(ti)

死亡受體(ti) 3抗體(ti)

死亡受體(ti) 4抗體(ti)

精神分裂症易感基因抗體(ti)

蓬亂(luan) 蛋白1抗體(ti)

異常凝血酶原/脫-γ-羧基凝血酶原抗體(ti)

結蛋白抗體(ti)

DISC1 C端抗體(ti)

DISC1 N端抗體(ti)

多能發育相關(guan) 基因2抗體(ti)

結腸直腸癌缺失基因抗體(ti)

多巴胺脫羧酶抗體(ti)

防禦素β1/Defensin β1抗體(ti)

DLX4抗體(ti)

DTX1抗體(ti)

絲(si) 裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體(ti)


 

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