樣本的前處理:
組織、細菌或細胞中胞漿蛋白與(yu) 線粒體(ti) 蛋白的分離:
①稱取約0.1g組織或收集500萬(wan) 細菌或細胞,加入1mL試劑一和10uL 試劑三,用冰浴勻漿 器或研缽勻漿。
②將勻漿600g,4℃離心5min。
③棄沉澱,將上清液移至另一離心管中,11000g,4℃離心10min。
④上清液即胞漿提取物,可用於(yu) 測定從(cong) 線粒體(ti) 泄漏的α-KGDH(此步可選做)。
⑤在步驟④的沉澱中加入200uL試劑二和2uL 試劑三,超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W, 超聲3秒,間隔10秒,重複30次),用於(yu) 線粒體(ti) α-KGDH活性測定。
測定原理:α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+ 和輔酶A生成琥珀酰輔酶A、二氧化碳和 NADH,NADH在340 nm有特征吸收峰,以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。自備實驗用品及儀(yi) 器:紫外分光光度計、水浴鍋、台式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
雙特異性酪氨酸磷酸化調節激酶DYRK2抗體(ti)
鋅指結構蛋白酶20抗體(ti)
C型凝集素受體(ti) CLEC13A抗體(ti)
雙甲基精氨酸水解酶2抗體(ti)
D酪氨酸激酶衰減蛋白1抗體(ti)
雙特異性酪氨酸磷酸化調節激酶3抗體(ti)
肌營養(yang) 蛋白α抗體(ti)
多巴胺β羥化酶抗體(ti)
抑癌基因抗體(ti)
DNA甲基轉移酶1抗體(ti)
DNA甲基轉移酶-3α抗體(ti)
DNA甲基轉移酶-3β抗體(ti)
死亡受體(ti) 3抗體(ti)
死亡受體(ti) 4抗體(ti)
精神分裂症易感基因抗體(ti)
蓬亂(luan) 蛋白1抗體(ti)
異常凝血酶原/脫-γ-羧基凝血酶原抗體(ti)
結蛋白抗體(ti)
DISC1 C端抗體(ti)
DISC1 N端抗體(ti)
多能發育相關(guan) 基因2抗體(ti)
結腸直腸癌缺失基因抗體(ti)
多巴胺脫羧酶抗體(ti)
防禦素β1/Defensin β1抗體(ti)
DLX4抗體(ti)
DTX1抗體(ti)
絲(si) 裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體(ti)