洗滌方法:
1. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,注入與(yu) 吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nei) 液體(ti) ,在潔淨的吸水紙上拍幹,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鍾,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nei) 的液體(ti) ,在厚的吸水紙上拍幹。洗板5次。
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫;試劑或樣品配製時,均需充分混勻,並盡量避免起泡。
1.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,餘(yu) 孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加於(yu) 酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育2小時。為(wei) 保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體(ti) ,甩幹,每個(ge) 孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鍾內(nei) 配製),酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時。
3.棄去孔內(nei) 液體(ti) ,甩幹,洗板 3次,每次浸泡1-2分鍾,大約350μl /每孔,甩幹並在吸水紙上輕拍將孔內(nei) 液體(ti) 拍幹。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨(lin) 用前15分鍾內(nei) 配製)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。
5.棄去孔內(nei) 液體(ti) ,甩幹,洗板5次,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鍾左右(根據實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鍾。當標準孔出現明顯梯度時,即可終止)。
7.每孔加終止液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與(yu) 底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標儀(yi) 在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀(yi) 電源,預熱儀(yi) 器,設置好檢測程序。
9.實驗完畢後將未用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束。
錨蛋白重複結構域蛋白33B抗體(ti)
載脂蛋白C3抗體(ti)
細胞凋亡增強核酸酶抗體(ti)
染色體(ti) 脆弱性相關(guan) 基因抗體(ti)
磷酸化蛋白激酶B抗體(ti)
銅轉運蛋白質β鏈抗體(ti)
酰基輔酶A合成酶家族4抗體(ti)
酸性磷酸酶樣蛋白2抗體(ti)
AHNAK核蛋白2抗體(ti)
二磷酸腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗體(ti)
p53誘導蛋白5抗體(ti)
錨蛋白重複域5抗體(ti)
腦鈉通道蛋白2抗體(ti)
腦鈉通道蛋白4抗體(ti)
小腸鈉通道蛋白5抗體(ti)
APXL蛋白抗體(ti)
酸敏感離子通道蛋白3抗體(ti)
天門冬氨酸β羥化酶抗體(ti)
精氨酸加壓素受體(ti) 2抗體(ti)
細胞骨架肌動蛋白樣蛋白3抗體(ti)
膜粘連蛋白8抗體(ti)
水通道蛋白8抗體(ti)
錨蛋白重複結構域蛋白40抗體(ti)
凋亡抑製因子5抗體(ti)
水通道蛋白-3抗體(ti)
載脂蛋白D抗體(ti)
丁酰基輔酶A合成酶3抗體(ti)
脂肪細胞源性亮氨酸氨基肽酶抗體(ti)
線粒體(ti) 凋亡誘導因子2抗體(ti)
ABL2蛋白抗體(ti)