中腦核仁蛋白抗體(ti) 生物素化標記實驗要點：

1.如在反應混合液中有疊氮鈉或遊離氨基存在,會(hui) 抑製標記反應。因此,蛋白質在反應前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩衝(chong) 液或0.5mol/L硼酸緩衝(chong) 液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質之間的分子比按蛋白質表麵的ε-氨基的密度會(hui) 有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個(ge) 不同的分子比來篩選最適條件；

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結合位點可能因此被封閉,導致抗體(ti) 失活；

4.由於(yu) 抗體(ti) 的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時可加入去汙劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當遊離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在於(yu) 抗體(ti) 的抗原結合位點時,或位於(yu) 酶的催化位點時,生物素化會(hui) 降低或損傷(shang) 抗體(ti) 蛋白的結合力或活性；

6.生物素還可能與(yu) 不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與(yu) 糖基共價(jia) 結合；

7.交聯反應後,應充分透析,否則,殘餘(yu) 的生物素會(hui) 對生物素化抗體(ti) 與(yu) 親(qin) 和素的結合產(chan) 生競爭(zheng) 作用；

8.在細胞的熒光標記實驗中,中和親(qin) 和素的本底低,但由於(yu) 鏈黴親(qin) 和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。

溫馨提示：

在實驗後,請注意回收稀釋的抗體(ti) 。回收的抗體(ti) 在進行Western實驗時至少可以重複使用10次。稀釋後的抗體(ti) ，包括已經使用過的稀釋抗

體(ti) ，4二保存。回收後重複使用的抗體(ti) ，使用方法同新鮮稀釋的抗體(ti) 。如果在重複使用過程中發現抗體(ti) 出現輕微混濁現象，可以10000g離心

1-3分鍾,取上清用於(yu) 後續檢測。如果回收的抗體(ti) 出現明顯的絮狀物或長需長菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體(ti) 。

為(wei) 了您的安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作。

JNK相互作用蛋白4抗體(ti)

氨基末端激酶1/2抗體(ti)

氨基末端激酶1/2/3抗體(ti)

氨基末端激酶1/3抗體(ti)

連接蛋白JPH4抗體(ti)

組蛋白去甲基轉移酶JMJD7抗體(ti)

磷酸化原癌基因c-Jun抗體(ti)

磷酸化活化蛋白激酶D抗體(ti)

磷酸化活化蛋白激酶B抗體(ti)

磷酸化活化蛋白激酶B抗體(ti)

磷酸化組蛋白去甲基化酶JMJD2B抗體(ti)

絲(si) 裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白2抗體(ti)

絲(si) 裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白3抗體(ti)

磷酸化氨基末端激酶1/2/3抗體(ti)

磷酸化蛋白質酪氨酸激酶JAK-1抗體(ti)

氨基末端激酶2抗體(ti)

連接介導調節蛋白抗體(ti)

氨基末端激酶3抗體(ti)

磷酸化活化蛋白激酶B抗體(ti)

JmjC結構域組蛋白去甲基化酶H3-K36抗體(ti)

組蛋白去甲基化酶JARID2抗體(ti)

JAK和微管相互作用蛋白2抗體(ti)

活化蛋白激酶B抗體(ti)

磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗體(ti)

凋亡細胞清除受體(ti) 抗體(ti)

磷酸化原癌基因c-Jun抗體(ti)

Notch配體(ti) Jagged 2蛋白抗體(ti)