酶液提取：

1. 組織：按照質量（g）：蒸餾水體(ti) 積(mL)為(wei) 1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL蒸餾水）加入蒸餾水，冰浴勻漿後於(yu) 4℃，12000rpm離心10min，取上清置於(yu) 冰上待測。

2. 細胞：按照細胞數量（104個(ge) ）：蒸餾水體(ti) 積（mL）為(wei) 500~1000：1的比例（建議500萬(wan) 細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然後4℃，12000rpm離心10min，取上清置於(yu) 冰上待測。

3. 培養(yang) 液或其它液體(ti) ：直接檢測。

自備實驗用品及儀(yi) 器

天平、研缽、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

試劑組成和配製

試劑一：液體(ti) 25mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體(ti) 40mL×1瓶，4℃保存。

濾紙條：50mg×50條。

測定原理

濾紙酶水解濾紙產(chan) 生的還原糖能與(yu) 3,5-二**水楊酸生成紅棕色氨基化合物，在540nm處有最大光吸收，在一定範圍內(nei) 反應液顏色深淺與(yu) 還原糖的量成正比，可測定計算得濾紙酶的活力。

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