準備試劑與(yu) 收集血樣：

雙重核酸試劑盒（熒光PCR法）　1.  收集標本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養(yang) 上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時；更長時間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反複凍融。

2.  標準品液配製：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管，管加標本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻後用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反複作對倍稀釋，從(cong) 第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為(wei) 空白對照。

3.  10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。

4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻後置 37 ℃ 120 分鍾。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印幹。

3.  每孔中加入抗體(ti) 工作液10 0ul 。將反應板充分混勻後置 37 ℃ 6 0 分鍾。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體(ti) 工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鍾。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應15 分鍾。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鍾內(nei) 用酶標儀(yi) 在 45 0 nm 處測 吸光值。

性能：

1. 準確性：標準品線性回歸與(yu) 預期濃度相關(guan) 係數R值，大於(yu) 等於(yu) 0.9900。

2. 靈敏度：檢測濃度小於(yu) 0.1 U/mL。

3. 特異性：不與(yu) 其它可溶性結構類似物交叉反應。

4. 重複性：板內(nei) 、板間變異係數均小於(yu) 15%。

5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

6. 有效期：6個(ge) 月

營養(yang) 肉湯培養(yang) 基

亞(ya) 碲酸鉀(慶大黴素瓊脂凍幹配套試劑)

亞(ya) 碲酸鉀(四號瓊脂凍幹配套試劑)

3%氯化鈉三糖鐵瓊脂

Cary-Blair氏運送培養(yang) 基（不含瓊脂）

Cary-Blair氏運送培養(yang) 基

60g/L氯化鈉蛋白腖水(PW)

慶大黴素瓊脂

3%氯化鈉溶液

我妻氏血瓊脂

3%氯化鈉胰蛋白腖大豆瓊脂

堿性瓊脂

四號瓊脂

TCBS瓊脂

緩衝(chong) -甘油氯化鈉溶液

3%氯化鈉堿性蛋白腖水

堿性蛋白腖水

SCDLP液體(ti) 培養(yang) 基

營養(yang) 瓊脂(普通肉湯瓊脂培養(yang) 基）

含鐵牛奶培養(yang) 基