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冰核細菌 血清/培養基菌種保藏方法
更新時間:2023-10-18   點擊次數:663次

保藏方法:

.斜麵低溫保藏法

產(chan) 品僅(jin) 用於(yu) 科研將菌種接種在適宜的斜麵培養(yang) 基上,待菌種生長*後,置於(yu) 4℃左右的冰箱中保藏,每隔一定時間(保藏期)再轉接至新的斜麵培養(yang) 基上,生長後繼續保藏,如此連續不斷。此法簡便易行,容易推廣,存活率高,故科研和上對經常使用的菌種大多采用這種保藏方法。

2.石蠟油封藏法

此法是在無菌條件下,將滅過菌並已蒸發掉水分的液體(ti) 石蠟倒入培養(yang) 成熟的菌種斜麵(或半固體(ti) 穿刺培養(yang) 物)上,石蠟油層高出斜麵頂端lcm,使培養(yang) 物與(yu) 空氣隔絕,加膠塞並用固體(ti) 石蠟封口後,垂直放在室溫或4℃冰箱內(nei) 保藏。由於(yu) 液體(ti) 石蠟阻隔了空氣,使菌體(ti) 處於(yu) 缺氧狀態下,而且又防止了水分揮發,使培養(yang) 物不會(hui) 幹裂,因而能使保藏期達~2年,或更長。但此法不適合厭氧性細菌。

3.砂土管保藏法

適用於(yu) 產(chan) 孢子的放線菌、黴菌及形成芽孢的細菌,對於(yu) 一些對幹燥敏感的細菌如奈氏球菌、弧菌和假單胞杆菌及酵母則不適用。砂土管法兼具低溫、幹燥、隔氧和無營養(yang) 物等諸條件,故保藏期較長、效果較好,且微生物移接方便,經濟簡便。它比石蠟油封藏法的保藏期長,約~0年。

4.麩皮保藏法

此法以麩皮作為(wei) 載體(ti) ,吸附接入的孢子,然後在低溫幹燥條件下保存。適用於(yu) 產(chan) 孢子的黴菌和某些放線菌,保藏期在年以上。因操作簡單,經濟實惠,工廠較多采用。

5.冷凍真空幹燥保藏法

簡稱凍幹法,通常采用保護劑製備擬保藏菌種的細胞懸液或孢子懸液於(yu) 安瓿管中,再在低溫下快速將含菌樣凍結,並減壓抽真空,使水升華將樣品脫水幹燥,形成*幹燥的固體(ti) 菌塊。並在真空條件下立即融封,造成無氧真空環境,置於(yu) 低溫下,使微生物處於(yu) 休眠狀態,而得以保藏。常用的保護劑有脫脂牛奶、血清、澱粉、葡聚糖等高分子物質。

6.液氮超低溫保藏法

以甘油、二甲基亞(ya) 碸等作為(wei) 保護劑,在液氮超低溫(-96℃)下保藏。其主要原理是菌種細胞從(cong) 常溫過渡到低溫,並在降到低溫之前,使細胞內(nei) 的自由水通過細胞膜外滲出來,以免膜內(nei) 因自由水凝結成冰晶而使細胞損傷(shang) 。此法操作簡便、高效、保藏期一般可達到5年以上,是目前被*的效的菌種保藏技術之一。


 

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