1 合適的細胞培養(yang) 基

合適的細胞培養(yang) 基是體(ti) 外細胞生長增殖的zui重要的條件之一,培養(yang) 基不僅(jin) 提供細胞營養(yang) 和促使細胞生長增殖的基礎物質,而且還提供培養(yang) 細胞生長和繁殖的生存環境。

2 血清

目前,大多數合成培養(yang) 基都需要添加血清.血清是細胞培養(yang) 液中zui重要的成分之一,含有細胞生長所需的多種生長因子及其它營養(yang) 成分。

3 無菌無毒細胞培養(yang) 環境

無菌無毒的操作環境和培養(yang) 環境是保證細胞在體(ti) 外培養(yang) 成功的首要條件.在體(ti) 外培養(yang) 的細胞由於(yu) 缺乏對微生物和有毒物的防禦能力,一旦被微生物或有毒物質汙染,或者自身代謝物質積累,可導致細胞中毒死亡.因此,在體(ti) 外培養(yang) 細胞時,必須保持細胞生存環境無菌無毒,及時清除細胞代謝產(chan) 物。

4 恒定的細胞生長溫度
維持培養(yang) 細胞旺盛生長,必須有恒定而適宜的溫度.不同種類的細胞對培養(yang) 溫度要求也不同.人體(ti) 細胞培養(yang) 的標準溫度為(wei) 36.5℃±0.5℃,偏離這一溫度範圍,細胞的正常代謝會(hui) 受到影響,甚至死亡.培養(yang) 細胞對低溫的耐受力較對高溫強,溫度上升不超過39℃時,細胞代謝與(yu) 溫度成正比;人體(ti) 細胞在39-40℃1小時,即能受到一定損傷(shang) ,但仍有可能恢複;在40-41℃1小時,細胞會(hui) 普遍受到損傷(shang) ,僅(jin) 小半數有可能恢複;41-42℃1小時,細胞受到嚴(yan) 重損傷(shang) ,大部分細胞死亡,個(ge) 別細胞仍有恢複可能;當溫度在43℃以上1小時,細胞全部死亡.相反,溫度不低於(yu) 0℃時,對細胞代謝雖有影響,但並無傷(shang) 害作用;把細胞放入25-35℃時,細胞仍能生存和生長,但速度減慢;放在4℃數小時後,再回到37℃培養(yang) ,細胞仍能繼續生長.細胞代謝隨溫度降低而減慢.當溫度降至冰點以下時,細胞可因胞質結冰受損而死亡.但是,如果向培養(yang) 液中加入一定量的冷凍保護劑（二甲亞(ya) 碸或甘油）,可在深低溫下如-80℃或-196℃（液氮）長期保存。

5 合適的氣體(ti) 環境

氣體(ti) 是哺乳動物細胞培養(yang) 生存必需條件之一,所需氣體(ti) 主要有氧氣和二氧化碳。