一、概念
　　電化學發光免疫測定(Electrochemiluminescence immunoassay,ECLI)。
　　ECLI 是繼放射免疫、酶免疫、熒光免疫、化學發光免疫測定以後的新一代標記免疫測定技術。電化學發光法源於(yu) 電化學法和化學發光法，而　ECLI 是電化學發光(ECL)和免疫測定相結合的產(chan) 物，是一種在電極表麵由電化學引發的特異性化學發光反應，包括了電化學和化學發光二個(ge) 過程。
　　ECL 不僅(jin) 可以應用於(yu) 所有的免疫測定，而且還可用於(yu) DNA／RNA探針檢測。
二、反應底物
　　ECL 反應底物有兩(liang) 種：
　　·三氯聯吡啶釕[Ru(bpy)3]2+絡合物：
　　釕(Ruthenium, Ru)，原子序數44，原子量101.07。元素名來自拉丁文，原意是"俄羅斯"。1827年俄國化學家奧讚在鉑礦中發現釕；1844年俄國化學家克勞斯肯定它是一種新元素。釕在地殼中的含量約為(wei) 十億(yi) 分之一，是鉑係元素中含量zui少的一個(ge) 。釕常與(yu) 其它鉑係元素一起分散於(yu) 衝(chong) 積礦床和砂積礦床中。釕有7種天然穩定同位素：釕96、98、99、100、101、102、104。
　　釕為(wei) 銀白色金屬，熔點2310℃，沸點3900℃，密度12.37×103/m3。
　　釕的化學性質不活潑，在空氣和潮濕環境中穩定；不溶於(yu) 酸和王水，溶於(yu) 熔融的強堿、碳酸鹽等；加熱到900℃，時能與(yu) 氧反應；加熱時能與(yu) 氟、氯、溴反應；釕有形成配位化合物的強烈傾(qing) 向，還有良好的催化性能。
　　釕是鉑和鈀的有效硬化劑；金屬鈦中加入0.1%的釕就可大大提高耐腐蝕性；釕鉬合金是一種超導體(ti) ；含釕的催化劑多用於(yu) 石油化工。
　　·三丙胺(Tripropylamine，TPA)：
　　結構式：
三、電化學發光反應原理

電化學反應過程：在工作電極上(陽極)加一定的電壓能量作用下，二價(jia) 的三氯聯吡啶釕 [Ru(bpy)3]2+ 釋放電子發生氧化反應而成為(wei) 三價(jia) 的三氯聯吡啶釕 [Ru(bpy)3]3+，同時，電極表麵的TPA也釋放電子發生氧化反應而成為(wei) 陽離子自由基 TPA+ ，並迅速自發脫去一個(ge) 質子而形成三丙胺自由基 TPA·，這樣，在反應體(ti) 係中就存在具有強氧化性的三價(jia) 的三氯聯吡啶釕 [Ru(bpy)3]3+ 和具有強還原性的三丙胺自由基 TPA·。

化學發光過程：具有強氧化性的三價(jia) 的三氯聯吡啶釕 [Ru(bpy)3]3+ 和具有強還原性的三丙胺自由基 TPA· 發生氧化還原反應，結果使三價(jia) 的三氯聯吡啶釕 [Ru(bpy)3]3+ 還原成激發態的二價(jia) 的三氯聯吡啶釕 [Ru(bpy)3]2+，其能量來源於(yu) 三價(jia) 的三氯聯吡啶釕 [Ru(bpy)3]3+ 與(yu) 三丙胺自由基 TPA· 之間的電勢差，激發態 [Ru(bpy)3]2+ 以熒光機製衰變並以釋放出一個(ge) 波長為(wei) 62Onm 光子的方式釋放能量，而成為(wei) 基態的 [Ru(bpy)3]2+。
　　循環過程：上述化學發光過程後，反應體(ti) 係中仍存在二價(jia) 的三氯聯吡啶釕 [Ru(bpy)3]2+ 和三丙胺(TPA)，使得電極表麵的電化學反應和化學發光過程可以繼續進行，這樣，整個(ge) 反應過程可以循環進行。
　　通過上述的循環過程，測定信號不斷的放大，從(cong) 而使檢測靈敏度大大提高，所以 ECL 測定具有高靈敏的特點。

四、電化學發光免疫原理
　　上述的電化學發光過程產(chan) 生的光信號的強度與(yu) 二價(jia) 的三氯聯吡啶釕 [Ru(bpy)3]2+ 的濃度成線性關(guan) 係。
　　將二價(jia) 的三氯聯吡啶釕　[Ru(bpy)3]2+　與(yu) 免疫反應體(ti) 係中的一種物質結合，經免疫反應、分離後，檢測免疫反應體(ti) 係中剩餘(yu) 二價(jia) 的三氯聯吡啶釕 [Ru(bpy)3]2+ 經上述過程後所發出的光，即可得知待檢物的濃度。