持久黴素檢定培養(yang) 基Ⅰ的操作步驟：

（一）準確稱量試劑：根據不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yang) 基，培養(yang) 基所需試劑必須純淨。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yang) 基各種成分放入容器內(nei) ，標記劃線，加熱溶解，補充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節pH值到適宜範圍內(nei) 。（三）過濾：將玻璃漏鬥置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏鬥中，將上述培養(yang) 基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾後的培養(yang) 基分裝於(yu) 中試管或三角瓶內(nei) （試管內(nei) 每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包紮好，準備滅菌。

（五）滅菌：培養(yang) 基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yang) 細胞在水中煮沸後即被殺死，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比幹熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體(ti) 吸收水分後，其蛋白質易於(yu) 凝固變性，因為(wei) 蒸汽的穿透力強，殺菌效果好。