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人咽鱗癌細胞 FaDu細胞實驗操作步驟
更新時間:2024-10-05   點擊次數:644次

       在成功獲取並培養(yang) 了後,接下來進入實驗操作的核心階段。首先,我們(men) 需要對細胞進行傳(chuan) 代處理,以確保實驗所需細胞量的充足及細胞活力的維持。具體(ti) 操作如下:


1. **準備培養(yang) 基與(yu) 試劑**:確保新鮮的培養(yang) 基(如RPMI-1640培養(yang) 基)已預熱至37℃,並含有10%胎牛血清及必要的抗生素(如青黴素和鏈黴素),以防汙染。同時,準備胰蛋白酶-EDTA溶液用於(yu) 細胞消化。


2. **細胞消化**:在顯微鏡下觀察FaDu細胞生長情況,當細胞密度達到約80%-90%時,吸去舊培養(yang) 基,用無菌PBS輕輕洗滌細胞兩(liang) 次,以去除殘留的培養(yang) 基和死細胞。隨後,加入適量預溫的胰蛋白酶-EDTA溶液,覆蓋細胞表麵,放入37℃、5% CO₂培養(yang) 箱中孵育約3-5分鍾,直至細胞間隙增大,形態變圓。


3. **細胞收集與(yu) 重懸**:輕輕拍打培養(yang) 皿底部,使細胞脫落,加入等體(ti) 積的新鮮培養(yang) 基終止胰酶作用,用移液槍輕輕吹打細胞懸液,確保細胞充分分散成單個(ge) 。


4. **細胞計數與(yu) 接種**:取少量細胞懸液進行計數,根據實驗需求調整細胞密度後,將適量的細胞懸液接種到新的培養(yang) 皿或培養(yang) 板中,輕輕搖晃使細胞均勻分布,然後放回培養(yang) 箱中繼續培養(yang) 。


5. **後續處理**:根據實驗目的,FaDu細胞可用於(yu) 多種實驗,如藥物敏感性測試、基因編輯、信號通路研究等。在接下來的步驟中,可能需要對細胞進行轉染、加藥處理或收集細胞進行分子生物學分析。每一步操作都需嚴(yan) 格遵循無菌原則,確保實驗結果的準確性和可靠性。


通過以上步驟,我們(men) 成功完成了FaDu細胞的傳(chuan) 代與(yu) 基本處理,為(wei) 後續深入研究奠定了堅實的基礎。


 

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