在繼續探討，即人未分化胃癌細胞的操作步驟時，我們(men) 需細致入微地確保每一步的精確性和無菌操作的重要性。

    首先，進行細胞複蘇時，需快速將凍存的HGC-27細胞從(cong) 液氮中取出，並迅速置於(yu) 37℃水浴中輕輕搖晃，確保細胞在1分鍾內(nei) 融化。隨後，將細胞懸液轉移至預裝有培養(yang) 基的離心管中，輕柔混勻後離心，去除上清液，再加入新鮮培養(yang) 基重懸細胞，接種至培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃、5% CO2的恒溫培養(yang) 箱中培養(yang) 。

   細胞傳(chuan) 代時，待細胞長至80%-90%融合度，棄去舊培養(yang) 基，用PBS清洗兩(liang) 次後，加入適量胰酶消化細胞，待細胞變圓、間隙增大時，加入培養(yang) 基終止消化，吹打製成細胞懸液，按一定比例分至新的培養(yang) 瓶中繼續培養(yang) 。

    此外，細胞凍存也至關(guan) 重要。選擇對數生長期的細胞，按上述方法消化、離心後，用細胞凍存液重懸細胞，調整細胞密度至適宜範圍，分裝至凍存管中，標記好細胞名稱、凍存日期等信息後，按梯度降溫法逐步冷凍，最終置於(yu) 液氮中長期保存。

    在整個(ge) 操作過程中，嚴(yan) 格的無菌操作、精準的細胞計數以及適時的培養(yang) 基更換，都是確保HGC-27細胞健康生長和實驗成功的關(guan) 鍵。