產(chan) 品及特點 本產(chan) 品經過天澤基因精心優(you) 化而得，多項指標超過國內(nei) 外同類產(chan) 品。本產(chan) 品是天澤基因在血液RNAOUT（CAT#：3071）基礎上開發的柱式升級產(chan) 品，專(zhuan) 門從(cong) 動物全血樣品中快速提取總RNA。跟血液RNAOUT相比，本產(chan) 品具有下列特點：
1. 比血液RNAOUT更加簡單快捷，直接使用新鮮的或冷凍的抗凝全血樣品，不需裂解紅細胞等任何預處理步驟，整個(ge) 提取過程隻需要十分鍾左右，可以全在室溫下進行。
2. 產(chan) 量和純度更高，OD260/280均在2.0左右，產(chan) 率一般為(wei) 2-5 ug/mL人血。
3. 每次微量提取的zui大樣品處理量可以達到1.5 mL，高於(yu) 進口的同類產(chan) 品。
4. 與(yu) 常用的抗凝劑（包括肝素，EDTA，檸檬酸鈉，草酸鈉）兼容，得到的RNA可以直接用於(yu) RT-PCR和Northern雜交等研究。
規格及成分 成 份 50次包裝
溶液A 50 mL
溶液B 15 mL
溶液C 50 mL
離心吸附柱 50套
通用洗柱液 50 mL
RNA洗脫液 10 mL
使用手冊(ce) 1份

運輸及保存 常溫運輸，4℃保存，有效期一年。
自備試劑 氯仿。
使用方法 1. 將0.2-1.5 mL新鮮或解凍後的抗凝全血加入到1.5 mL塑料離心管中。
2. 12000-15000 g室溫離心3分鍾，棄上清（血漿）。如果此時血液細胞沉澱體(ti) 積大於(yu) 0.2 mL， 則需要減少血液的使用量，具體(ti) 減少量需根據具體(ti) 情況決(jue) 定，因為(wei) 各個(ge) 個(ge) 體(ti) （尤其是患者）血液中白細胞數目差別很大。
3. 將1 mL溶液A加入到血液細胞沉澱中，用移液槍吹打沉澱使細胞裂解。
4. 將0.3 mL的溶液B加入到離心管中，劇烈震蕩30秒。
5. 和0.2 mL氯仿加入到離心管中，劇烈震蕩30秒。
6. 12000-15000 g室溫離心3-5分鍾，將上清液（為(wei) 無色或淺紅色，約0.5-0.9 mL）轉移到另一幹淨離心管中。注意：轉移的液體(ti) 不要超過0.7 mL，否則下一步不能加入等體(ti) 積的溶液C。為(wei) 防止汙染，留100 uL左右的上清液。下層有機相一般呈深紅色，中間層為(wei) 白色，含有DNA，蛋白質和其他細胞破碎物，避免觸及或吸取。
7. 加入等體(ti) 積的溶液C，充分顛倒混勻。
8. 分兩(liang) 次將溶液轉移到離心吸附柱中，每次轉移後12000-15000 g室溫離心半分鍾，棄穿透液。
9. 加0.7 mL通用洗柱液，室溫離心半分鍾，棄穿透液。
10. 如果有必要，可以再加0.3 mL通用洗柱液，室溫離心半分鍾，棄穿透液。注意：增加此步可以進一步提高RNA的純度。
11. 室溫12000-15000 g離心半分鍾。此步十分重要，否則殘留的通用洗柱液會(hui) 影響RNA的後續反應。
12. 將離心吸附柱轉移到一個(ge) RNase-free的收集管中，加入50-100 uL RNA洗脫液，室溫放置1-2分鍾。
13. 12000-15000 g室溫離心半分鍾，離心管中溶液即為(wei) RNA樣品，可以立即使用或存放於(yu) -80℃待用。
14. RNA完整性的電泳檢測：如果需要做Northern雜交，強烈建議用戶使用甲醛變性膠進行RNA電泳，因為(wei) 非變性膠不能分離所有的RNA分子（BioTechniques，28：414，2000）。
15. RNA產(chan) 量產(chan) 率測定：將5-10 μL RNA溶於(yu) TE緩衝(chong) 液中（pH7.5-8.2之間）檢測其在OD260的光吸收。通過光吸收可以得出RNA濃度（1 OD260的RNA=40 μg/mL），進而計算出RNA的產(chan) 量（濃度X體(ti) 積）和產(chan) 率（RNA產(chan) 量/組織用量）。人血RNA產(chan) 率一般為(wei) 2-5 ug/mL。
16. RNA純度測定：無汙染的總RNA的OD260/OD280一般在2.0左右（具體(ti) 數值與(yu) 其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guan) ），高於(yu) 此範圍則分別表示樣品可能有蛋白質汙染，但一般不影響RT-PCR等反應。