產(chan) 品及特點 本試劑盒是用於(yu) 質粒DNA大量製備與(yu) 純化的試劑盒。菌體(ti) 先經堿裂解法處理，再通過離心吸附柱，專(zhuan) 一結合DNA，zui後洗去雜質，快速提取質粒DNA，全套操作可以在30分鍾之內(nei) 完成。使用本試劑盒可從(cong) 50-100 mL過夜培養(yang) 的菌液純化得到高達300-500 ug的高純度質粒DNA（OD260/OD280 = 1.8-2.0），可以直接用於(yu) 酶切、轉化、測序及PCR等。
1． 快速、步驟少，整個(ge) 操作在半個(ge) 小時之內(nei) 完成。
2． 純度高，采用本試劑盒提取的質粒OD比值在1.8-2.0之間。
3． 產(chan) 量高，每毫升過夜培養(yang) 的細菌可以提取到2-5 ug/mL。
4． 用途廣，適用於(yu) 低拷貝和高拷貝質粒。
5． 價(jia) 格低，比多數國內(nei) 同類產(chan) 品的價(jia) 格更便宜。
規格及成分 成 份 5次包裝 10次包裝
溶液A 30 mL 60 mL
溶液B 30 mL 60 mL
RNase A溶液（10mg/mL） 0.3 mL 0.6 mL
溶液C 40 mL 80 mL
大提離心吸附柱 5套 10套
通用洗柱液 100 mL 200 mL
DNA洗脫液2.0 10 mL×2 50 mL
使用手冊(ce) 1份 1份

運輸及保存 RNase A溶液需要-20℃保存，其餘(yu) 成分可室溫或4℃保存，如有沉澱可加熱溶解後再使用。
自備試劑 無。
使用方法 1. 用250 mL離心管收集100-300 mL菌液，5000 rpm 離心10分鍾，去除上清。
2. 往細菌沉澱中加入6 mL溶液A，充分振蕩懸浮（*次使用時需要將RNase A溶液全部加入到溶液A中並混合均勻，未用完的、含RNase A的溶液A需放4℃保存）。注意：充分重懸細胞沉澱使之無細胞結塊狀物對於(yu) 獲得高的質粒產(chan) 量十分重要。
3. 加入6 mL 溶液B，溫和翻轉10 餘(yu) 次至透明。若混合液不透明，應減少細菌的用量或室溫放置5-10分鍾直到裂解液變透明。注意: 避免劇烈振蕩，否則細菌基因組DNA將斷裂為(wei) 小片段，與(yu) 質粒難以分離，汙染質粒DNA。
4. 加入冰浴的8 mL 溶液C，顛倒混勻，冰上放置10分鍾。混合物中將有白色絮狀物形成。注意不要過分振蕩。
5. 6000 rpm離心10分鍾。如果離心管承受能力強，離心速度還可以適當提高以充分沉澱絮狀物。
6. 將上清液（約20 mL）轉移到離心吸附柱中，放入50 mL 套管中。
7. 6000 rpm 離心5 分鍾，質粒DNA將與(yu) 離心吸附柱中的膜結合。棄穿透液。
8. 將10 mL 通用洗柱液加入到離心吸附柱中，室溫靜置2 分鍾後6000 rpm 離心5分鍾，棄穿透液。
9. 重複上步一次，即將10 mL通用洗柱液加入到離心吸附柱中，室溫靜置2 分鍾後6000 rpm 離心5分鍾，棄穿透液。
10. 室溫6000 rpm 空甩5分鍾，棄穿透液。注意：此步對去除殘留通用洗柱液很重要，否則通用洗柱液會(hui) 影響DNA的使用。
11. 將離心吸附柱放入一個(ge) 自備的、幹淨的50 mL塑料離心管中，加1 mL DNA洗脫液2.0（洗脫液如加熱到50-65℃效果更佳），室溫靜置2分鍾後6000rpm 離心5分鍾，收集液即是質粒DNA溶液。
12. 本試劑盒中的離心吸附柱吸附能力較強，所以再用1 mL DNA洗脫液2.0洗脫3-4次才能把絕大部分質粒DNA洗脫下來。得到的RNA可以收集在一起立即使用或存放於(yu) -80℃待用。注：如果DNA洗脫液不夠，可以用自備的DEPC水代替。注：一般情況下，*次洗脫可以洗脫約25%的質粒DNA；第二次洗脫可以洗脫約35%的質粒DNA；第三次洗脫可以洗脫約20%的質粒DNA；第四次洗脫可以洗脫約10%的質粒DNA；第五次洗脫可以洗脫約8%的質粒DNA。
13. 合並所得質粒DNA，立即使用或-20℃儲(chu) 存。如果需要使用液相內(nei) 毒素清除劑清除質粒DNA中的內(nei) 毒素，可以直接將此步所得的DNA溶液用於(yu) 去內(nei) 毒素處理。如果DNA濃度太低，可以另購本公司的核酸濃縮劑進行濃縮。