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研生試劑-酶標儀的選擇、自檢和校準
更新時間:2014-04-28   點擊次數:868次

研生試劑-酶標儀(yi) 的選擇、自檢和校準

 

一、酶標儀(yi) 的自檢和校準從(cong) 上述所獲的酶標儀(yi) 性能的有關(guan) 信息資料,基本上可以說是間接的,有了目標以後,如果還想獲得對某一酶標儀(yi) 的感性認識,可以對其進行自檢,主要有下述幾個(ge) 方麵。
   (一)外觀
   酶標儀(yi) 上應有儀(yi) 器名稱,型號,編號,,出廠日期和電源電壓;各調節旋鈕,按鍵和開關(guan) 均能正常工作,外表麵無明顯機械損傷(shang) ;顯示文字應清楚完整。
   (二)酶標儀(yi) 的穩定性(漂移)
   選用492nm波長,在吸光度o.0A處,測定標稱值為(wei) 1.0A的光譜中性濾光片(測定操作按儀(yi) 器說明進行),記錄儀(yi) 器示值或均值,10min後再次記錄儀(yi) 器示值或均值,前後兩(liang) 次測定值之差不應超過±0.00。
   (三)吸光度測定的準確度
   選用405,492和620 nm波長,以空氣為(wei) 參比,分別測定標稱值為(wei) 0.5和1.0A的光譜中性玻璃濾光片,用測試板代替酶標板,按儀(yi) 器說明連續測定3次,按下式計算準確度:AA=1/3(A、+A。+A3)—A:(A:為(wei) 標準值)。
   (四)吸光度測定的重複性
   波長選擇同(3),在酶標板*排加注空白溶液,第二排加入濃度為(wei) 200rig/ml的重鉻酸鉀溶液,重複測定5次。記錄每次測定的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值與(yu) 各次對應孔吸光度值。按下式計算重複性:
   (五)酶標儀(yi) 的線性
選用540nm波長,將標稱值o.5,1.0A中性濾光片分別放入測試板樣本位置中,以空氣為(wei) 參比,各重複測定3次;然後將以上兩(liang) 片中性濾光片疊加後置於(yu) 測試板的同一孔位中,重複測定3次。線性誤差:
   式中A1為(wei) *片中性濾光片吸光度均值,A:為(wei) 第二片中性濾光片吸光度均值,A1,2為(wei) 兩(liang) 片中性濾光片疊加後的吸光度均值。
   (六)測定速度的檢定 .
   選用492nm波長,放人96孔酶標板進行測定,用秒表計測儀(yi) 器打印出全部數據的時間。
   酶標儀(yi) 除了在選購時,應盡可能自檢外,在使用中也應定期檢定,以保證酶標儀(yi) 測定的有效性。
   附:200ttg/ml重鉻酸鉀溶液的配製
   將重鉻酸鉀固體(ti) 試劑放人稱量瓶中(去蓋)置於(yu) 烘箱中,在105±5℃下烘2h後,置於(yu) 幹燥器內(nei) 冷卻30min,在分析天平上準確稱取o.2829g,置於(yu) 100ml燒杯中,用o.05mol/L稀硫酸溶解後,移入500ml容量瓶中,以少量o.05mol/L稀硫酸洗燒杯3次,洗液並入容量瓶中,用0.05mol/L稀硫酸稀釋至刻度線,搖勻。
二、酶標儀(yi) 的選擇
       麵對類型如此眾(zhong) 多的酶標儀(yi) ,實驗室在選擇時往往有難以適從(cong) 的感覺。一般來說,用於(yu) 酶免疫測定比色的酶標儀(yi) 可分為(wei) 普通酶標儀(yi) ,多功能全自動酶標儀(yi) 和全自動酶免疫分析係統等,普通酶標儀(yi) 的功能基本上相當於(yu) 一個(ge) 微孑L板比色計,而多功能全自動酶標儀(yi) 除了有微孔板比色功能外,還有酶標動力學,紫外乃至凝集等多種檢測功能;全自動酶免疫分析係統則有試劑“開放”和“限定”之分,所謂試劑“開放”是指不同品牌的ELISA試劑均可用於(yu) 該儀(yi) 器,而試劑“限定”則必須使用儀(yi) 器的酶免測定試劑。實驗室在選擇酶標儀(yi) 時,一般應遵循這樣幾條原則:
   1.根據工作需要去選擇。切忌刻意去求功能多,因為(wei) 一則如果儀(yi) 器功能過多,易出故障,二則有些功能如酶標動力學或凝集等,可能根本就用不上;如果擬購置的酶標儀(yi) 主要是用於(yu) 定性測定,則不必要求的定量所需的軟件係統。至於(yu) 全自動酶免疫分析係統則對工作量比較大的血站或大型醫院較為(wei) 適用,對於(yu) 日常工作量不太大的實驗室,就無必要。
   2.根據酶標儀(yi) 的性能去選擇。反應酶標儀(yi) 性能的指標主要有測定波長範圍,濾光片配置,檢測速度,吸光度範圍,線性範圍,分辨率,準確度,精密度等。
   3.根據自己實驗室的財力去選擇。酶標儀(yi) 品種類型多,由於(yu) 性能不一,價(jia) 格自然也就相差較大,實驗室可根據自己的財力去選擇性能/價(jia) 格比較為(wei) 合適的酶標儀(yi) 。
   4.根據售後服務去選擇。實驗室儀(yi) 器買(mai) 了以後,就跟我們(men) 家裏使用的家用電器一樣,在使用過程中及使用一段時間之後,很可能就會(hui) 有保修或維修方麵的問題,因此一定要選擇售後服務好的公司的酶標儀(yi) 。
   5.根據實驗室人員的外語水平去選擇。進口酶標儀(yi) 現有不少已使用中文人機對話,對於(yu) 英語上有困難的實驗室,應盡可能選用此類酶標儀(yi) 。
   確定了選擇原則以後,就是怎樣去選擇了。選擇的步驟首先是要獲取有關(guan) 酶標儀(yi) 的信息資料,一般有這樣幾條途徑:
   ①向已購不同酶標儀(yi) 的多家實驗室同行谘詢訪問,獲取zui直接的使用效果的信息;
   ②酶標儀(yi) 銷售商的信息廣告及介紹;
   ③機構的儀(yi) 器評估報告。
   獲取了盡可能多的酶標儀(yi) 信息資料後,就是對不同類型的酶標儀(yi) 的性能指標進行比較,選擇較為(wei) 適合本實驗室的一種或二,三種再向銷售商作進一步的詳細谘詢了解,以決(jue) 定選擇哪一種進行自檢。

 

 

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