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xl18luck新利洗板方法和工作原理分析
更新時間:2014-07-15   點擊次數:1098次

ELISA檢測試劑盒洗板方法有以下兩(liang) 點。

    1.  手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nei) 的液體(ti) ;在實驗台上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩衝(chong) 液至少0.3ml注入孔內(nei) ,浸泡1-2分鍾,根據需要,重複此過程數次。

    2.  自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用後再用到正式實驗過程中。待檢樣本:體(ti) 液、血清、血漿、細胞培養(yang) 上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等

    應用定性夾心免疫檢測技術,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自於(yu) 該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。

   ELISA檢測試劑盒將樣品或標準品加入孔中並孵育,如果其中存在HEV IgM抗體(ti) ,這些抗體(ti) 就會(hui) 與(yu) HEV 的多肽抗原結合,並固定在上麵,洗板除去其它非特異性抗體(ti) 和樣品中的其它成份。

   然後加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結合物,經第二次孵育後,酶結合物就會(hui) 與(yu) *次孵育結合上的HEV IgM抗體(ti) 相結合,洗板除去未結合的酶結合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會(hui) 發生酶-底物反應,ELISA檢測試劑盒隻有那些含有HEV IgM抗體(ti) 和酶結合物所形成的複合物的孔才會(hui) 發生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應,並在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體(ti) elisa試劑盒的測試標準, O.D.值大於(yu) 或等於(yu) Cut-Off值的樣品被認為(wei) 是初試陽性。

 

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