根據腫瘤細胞比成纖維細胞貼壁速度慢的特點，並結合使用不加血清的營養(yang) 液，把含有兩(liang) 類細胞的細胞懸液反複貼壁，使兩(liang) 類細胞相互分離，操作方法與(yu) 傳(chuan) 代相同。

　　（1）待細胞生長達一定數量後，倒出舊培養(yang) 液，用胰酶消化後，Hanks 衝(chong) 洗2次，加入不含血清的培養(yang) 液，吹打製成細胞懸液；

　　（2）取編號為(wei) 此A、B、C三個(ge) 培養(yang) 瓶；首先把懸液接種入A培養(yang) 瓶中。置溫箱中靜止培養(yang) 5～20分鍾後，輕輕傾(qing) 斜培養(yang) 瓶，讓液體(ti) 集中瓶角後慢慢吸出全部液，再接種入B培養(yang) 瓶中後；向A瓶中補充少許*培養(yang) 液置溫箱中繼續培養(yang) ；

　　（3）培養(yang) B瓶中細胞5～20分鍾後，接處理A的方法，把培養(yang) 液注入C培養(yang) 瓶中；再向B瓶中補加*培養(yang) 基。

　　當三個(ge) 瓶內(nei) 都含有液後，均在溫箱中繼續培養(yang) 。如操作成功，次日觀察可見A瓶主要為(wei) 成纖維細胞，B瓶兩(liang) 類細胞相雜，C瓶可能主要為(wei) 癌細胞。必要時可反複處理多次，直至癌細胞純化為(wei) 止。 

    是用不鏽鋼絲(si) 末端插有橡膠刮頭（用膠塞剪成三角形插以不鏽鋼絲(si) ）、或裹少許脫脂棉製成，裝入試管中高壓滅菌後備用（也可用特製電熱燒灼器刮除）。刮除程序為(wei) ：

　　（1）標記：鏡下觀察，用不脫色筆在培養(yang) 瓶皿的背麵圈下生長腫瘤細胞的部位；

　　（2）刮除：棄掉培養(yang) 液，把無菌膠刮伸入瓶皿中，肉眼或顯微鏡窺視下，刮除無標記空間；

　　（3）用Hanks液衝(chong) 洗一兩(liang) 次，洗除被刮掉的細胞；

　　（4）注入液繼續培養(yang) ，如發現仍有成纖維細胞殘留，可重複刮除至*除掉為(wei) 止。