細胞在體(ti) 外培養(yang) 中所需的條件與(yu) 體(ti) 內(nei) 細胞基本相同。

　　1、無汙染環境

　　培養(yang) 環境無毒和無菌是保證細胞生存的首要條件。當細胞放置於(yu) 體(ti) 外培養(yang) 時，與(yu) 體(ti) 內(nei) 相比細胞丟(diu) 失了對微生物和有毒物的防禦能力，一旦被汙染或自身代謝物質積累等，可導致細胞死亡。因此在進行培養(yang) 中，保持細胞生存環境無汙染、代謝物及時清除等，是維持細胞生存的基本條件。

　　2、恒定的溫度

　　維持細胞旺盛生長，必須有恒定適宜的溫度。人體(ti) 細胞培養(yang) 的標準溫度為(wei) 36.5℃±0.5℃，偏離這一溫度範圍，細胞的正常代謝會(hui) 受到影響，甚至死亡。培養(yang) 細胞對低溫的耐受力較對高溫強，溫度上升不超過39℃時，細胞代謝與(yu) 溫度成正比；人體(ti) 細胞在39-40℃1小時，即能受到一定損傷(shang) ，但仍有可能恢複；在40-41℃1小時，細胞會(hui) 普遍受到損傷(shang) ，僅(jin) 小半數有可能恢複；41-42℃1小時，細胞受到嚴(yan) 重損傷(shang) ，大部分細胞死亡，個(ge) 別細胞仍有恢複可能；當溫度在43℃以上1小時，細胞全部死亡。

　　3、氣體(ti) 環境

　　氣體(ti) 是人體(ti) 細胞生存必需條件之一，所需氣體(ti) 主要有氧氣和二氧化碳。氧氣參與(yu) 三羧酸循環，產(chan) 生供給細胞生長增殖的能量和合成細胞生長所需用的各種成分。開放培養(yang) 時一般把細胞置於(yu) 95%空氣加5%二氧化碳混合氣體(ti) 環境中。

　　二氧化碳既是細胞代謝產(chan) 物，也是細胞生長繁殖所需成分，它在細胞培養(yang) 中的主要作用在於(yu) 維持培養(yang) 基的PH值。大多數細胞的適宜PH為(wei) 7.2-7.4，偏離這一範圍對細胞培養(yang) 將產(chan) 生有害的影響。但細胞耐酸性比耐堿性大一些，在偏酸環境中更利於(yu) 細胞生長。有資料顯示，原代羊水細胞培養(yang) PH6.8時zui適。

　　細胞培養(yang) 液PH濃度的調節zui常用的為(wei) 加NaHCO3的方法，因為(wei) NaHCO3可供CO2，但二氧易於(yu) 逸出，故zui適用於(yu) 封閉培養(yang) ，而輕乙基呱嗪乙硫磺酸（HEPES）因其對細胞無毒性，也起緩衝(chong) 作用，有防止PH迅速變動的特性而用於(yu) 開放細胞培養(yang) 技術中，其zui大優(you) 點是在開放式培養(yang) 或細胞觀察時能維持較恒定的PH值。

    細胞以玻璃器皿為(wei) 主，常準備zui需是使用zui的三倍。器皿應選擇透明度好、無毒、中性硬度玻璃製品。常用的玻璃器皿有下麵幾種。

　　（1）液體(ti) 儲(chu) 存瓶：用於(yu) 儲(chu) 存各種配製好的培養(yang) 液、血清等液體(ti) ，常以500ml、250ml、100ml生理鹽水瓶或血漿瓶代替。

　　（2）培養(yang) 瓶：根據培養(yang) 細胞種類要求不同培養(yang) 瓶的形態各異，用於(yu) 細胞傳(chuan) 代培養(yang) 的細胞要求瓶壁厚簿均勻，便於(yu) 細胞貼壁生長和觀察，瓶口要大小一致，口徑一般不小於(yu) 1cm，允許吸管伸入瓶內(nei) 任何部位，規格有200ml、100ml、50ml、25ml、10ml等幾種。用於(yu) 外周血培養(yang) 的常用10ml普通圓瓶。兩(liang) 種培養(yang) 瓶均要求選用玻璃製成。

　　（3）皿：用於(yu) 開放式培養(yang) 及其它用途。分直徑30mm、60mm、120mm等幾種。

　　（4）吸管：常用的有長吸管和短吸管兩(liang) 類，長吸管也稱刻度吸管。其改良後管上部有球型刻度稱改良吸管，刻度吸管用於(yu) 移動液體(ti) 。常用1ml和10ml兩(liang) 種。短吸管也叫滴管，分彎頭和直頭兩(liang) 種。

　　（5）離心管：離心管是細胞培養(yang) 中使用zui廣泛的器皿，根據用途不同形態各樣，常用於(yu) 細胞培養(yang) 的離心管有大腹式尖底離心管和普通尖底離心管兩(liang) 類。前者分別為(wei) 50ml、30ml、15ml；後者則多為(wei) 10ml和5ml。

　　（6）其它：如三角燒瓶、燒杯、量筒、漏鬥、注射器等。