用於(yu) 生物製藥和疫苗的細胞在體(ti) 外時,多數呈貼壁生長或兼性貼壁生長;而當其在無血清、無蛋白培養(yang) 基中生長時,由於(yu) 缺乏血清中的各種粘附貼壁因子如纖粘連蛋白、層粘連蛋白、膠原、玻表粘連蛋白,細胞往往以懸浮形式生長。
添加組分包括以下幾大類物質
(1)、促貼壁物質:許多細胞必須貼壁才能生長,這種情況下無血清培養(yang) 基中一定要添加促貼壁和擴展因子,一般為(wei) 細胞外基質,如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們(men) 還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子,對許多細胞的繁殖和分化,起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細胞的貼壁與(yu) 分化,這些細胞包括成纖維細胞、肉瘤細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質細胞、CHO細胞、成肌細胞等。
(2)、促生長因子及激素:針對不同細胞添加不同的生長因子。激素也是刺激細胞生長、維持細胞功能的重要物質,有些激素是許多細胞*的,如胰島素。
(3)、酶抑製劑:培養(yang) 貼壁生長的細胞,需要用胰酶消化傳(chuan) 代,在無血清中*須含酶抑製劑,以終止酶的消化作用,達到保護細胞的目的。zui常用的是大豆胰酶;抑製劑。
(4)、結合蛋白和轉運蛋白:常見如轉鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加比較大,可增加培養(yang) 基的粘度,保護細胞免受機械損傷(shang) 。許多 旋轉式培養(yang) 的無血清培養(yang) 基都含有牛血清白蛋白。
(5)、微量元素:硒是zui常見的。