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培養基研究中性粒細胞的堿性磷酸酶染色
更新時間:2014-08-01   點擊次數:1159次

  原理:中性粒細胞堿性磷酸酶的顯示方法有偶氮偶聯法和鈣—鈷法兩(liang) 種。前者的染色原理是血細胞內(nei) 堿性磷酸酶在pH為(wei) 9.4-9.6的條件下,將基質液中的α-磷酸萘酚鈉水解,產(chan) 生α-萘酚與(yu) 重氮鹽偶聯形成灰黑色沉澱,定位於(yu) 細胞質內(nei) 酶活性所在之處。鈣-鈷法染色是堿性磷酸酶在堿性條件下將基質液中的β-甘油磷酸鈉水解,產(chan) 生磷酸鈉。磷酸鈉依次與(yu) 硝酸鈣、硝酸鈷、硫化銨發生反應,形成不溶性棕黑色的硫化鑽,定位於(yu) 酶活性之處。

  結果:磷酸醇主要存在於(yu) 成熟階段的中性粒細胞(分葉核及杆狀核),其他血細胞均呈陰性反應。陽性反應為(wei) 胞質中出現灰色到棕黑色顆粒,反應強度分為(wei) 5級,即“—”、“1+”、“2+”、“3+”、“4+”。反應結果以陽性反應細胞百分率和積分值來表示。血塗片染色後,在油漫鏡下,觀察100個(ge) 成熟中性粒細胞,陽性反應細胞所占百分率即為(wei) 陽性率;對所有陽性反應細胞逐個(ge) 按反應強度分級,將各級所占的百分率乘以級數,然後相加,即為(wei) 積分值。

    用於(yu) 亞(ya) 利桑那沙門氏菌的選擇性分離(SN標準) Salmonella Arizona Agar 亞(ya) 利桑那菌瓊脂(SA)   100
用於(yu) 沙門氏菌的選擇性增菌培養(yang) (GB標準) Rappaport-Vassiliadis Mdeium 氯化鎂孔雀綠肉湯(MM,RV Medium)   250
用於(yu) 沙門氏菌的選擇性分離培養(yang) (FDA標準) Hektoen Enteric Agar HE 瓊脂(HE)   250
生化培養(yang) 基,賴氨酸脫羧酶試驗(GB、SN標準) Lysine-decarboxylase Test Broth 賴氨酸脫羧酶培養(yang) 基    5
生化培養(yang) 基,用於(yu) 細菌脲酶檢測(GB、SN標準) Urease Agar Base  尿素酶瓊脂基礎   250
加入尿素酶瓊脂基礎 40%Urea Water 40%尿素水       5ml*10
生化培養(yang) 基,用於(yu) 細菌V-P試驗(SN標準) Voges-Proskauer Semisolid Agar V-P 半固體(ti) 瓊脂    250
生化培養(yang) 基,用於(yu) 細菌靛基質試驗,亦稱色氨酸肉湯(SN標準) Indole Medium 吲哚       10
吲哚(靛基質)試驗配套試劑 Kovacs氏靛基質試劑盒 10ml*1
生化培養(yang) 基,用於(yu) 細菌丙二酸鹽利用試驗(GB、SN標準) Malonate Broth 丙二酸鈉培養(yang) 基    10
生化培養(yang) 基,用於(yu) 細菌衛予醇發酵試驗(SN標準) Dulcitol Semisolid Agar 衛矛醇半固體(ti) 瓊脂     10
主要用於(yu) 誌賀氏菌的增菌培養(yang) ,亦可用於(yu) 沙門氏菌增菌培養(yang) (GB標準) Gram Negative Enrichment Broth GN 增菌液     250
選擇性培養(yang) 基,主要用於(yu) 分離誌賀氏菌屬,亦可用於(yu) 分離沙門氏菌(FDA標準) Xylose Lysine Desoxycholate Medium XLD 培養(yang) 基       250
用於(yu) 沙門氏菌的選擇性分離(GB標準) WS Salmonella Agar WS 瓊脂     250
用於(yu) 誌賀氏菌的葡萄糖銨試驗(GB標準) Ammonium Dextrose Medium 葡萄糖銨   250
用於(yu) 誌賀氏菌的複合生化試驗(GB標準) Dextrose Semisolid Medium 葡萄糖半固體(ti) 培養(yang) 基    250
用於(yu) 細菌的複合生化試驗 Motility Indol Urea Medium Base 動力-吲哚-尿素培養(yang) 基基礎(MIU)  250
用於(yu) 硫化氫試驗 Lead Acetate Medium 醋酸鉛培養(yang) 基   250
用於(yu) 硫化氫、動力、吲哚試驗 Hydrogen Sulfide Indole Motility Medium SIM培養(yang) 基   250

  臨(lin) 床意義(yi) :NAP活性可因年齡、性別、應激狀態、月經周期、妊娠及分娩等因素有一定的生理性變化。在病理情況下,NAP活性的變化常有助於(yu) 某些疾病的診斷和鑒別診斷。 

 

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