氨基酸

　　氨基酸是組成的基本單位.不同種類的細胞對氨基酸的要求各異,但有幾種氨基酸細胞自身不能合成,必須依靠培養(yang) 液提供,這幾種氨基酸稱為(wei) 必需氨基酸.其中穀氨酰胺是細胞合成核酸和蛋白質必需的氨基酸,在缺少穀氨酰胺時,細胞生長不良而死亡.因此,各種培養(yang) 液中都有較大量的穀氨酰胺.但是,由於(yu) 穀氨酰胺在溶液中很不穩定,應置於(yu) -20℃冰箱中保存,在使用前加入培養(yang) 液內(nei) .已含穀氨酰胺的培養(yang) 液在4℃冰箱中儲(chu) 存2周以上時,還應重新加入原來量的穀氨酰胺.

　　碳水化合物

　　碳水化合物是細胞生長主要能量來源,其中有的是合成和核酸的成分.主要有葡萄糖,核糖,脫氧核糖,丙酮酸鈉和醋酸等.

　　無機鹽

　　液中無機鹽的主要功能是幫助細胞維持滲透壓平衡.此外,通過提供鈉,鉀和鈣離子,幫助細胞調節細胞膜功能.培養(yang) 液的滲透壓是一個(ge) 非常重要的因素, 細胞通常可耐受260mOsm/kg 320 mOsm/kg.標準培養(yang) 液的滲透壓在此範圍內(nei) 波動.特別注意:向培養(yang) 液中加入其它物質有可能會(hui) 明顯改變培養(yang) 液的滲透壓,特別是溶於(yu) 強酸或強堿中的物質.向培養(yang) 液中添加HEPES時需按以下方法調節鈉離子濃度.

　　緩衝(chong) 係統

　　大多數細胞所需pH 在7.2 - 7.4.但是,細胞zui適pH值隨培養(yang) 的細胞種類不同而不同.成纖維細胞喜歡較高pH (7.4 - 7.7), 而傳(chuan) 代轉化細胞係則需要偏酸pH (7.0 - 7.4).由於(yu) 多數培養(yang) 液靠碳酸氫鈉(NaHCO3)與(yu) CO2體(ti) 係進行緩衝(chong) ,因此,氣相中的CO2濃度應與(yu) 培養(yang) 液中碳酸氫鈉濃度相平衡.如果氣相或培養(yang) 箱空氣中CO2濃度設定在5%,培養(yang) 液中NaHCO3的加入量為(wei) 1.97g/L;如果CO2濃度維持在10%,培養(yang) 液中NaHCO3的加入量為(wei) 3.95g/L.細胞培養(yang) 瓶蓋不應擰得太緊,以保證氣體(ti) 交換. HEPES 是一種非離子緩衝(chong) 液,在pH 7.2 - 7.4 範圍內(nei) 具有較好的緩衝(chong) 能力,但是非常昂貴,在高濃度時對一些細胞可能有毒.HEPES緩衝(chong) 液可與(yu) 低水平的碳酸鈉(0.34g/L)共用,以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加.在這種培養(yang) 條件下,細胞瓶的蓋子應擰緊,以防止培養(yang) 液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中.大多數培養(yang) 液中含有酚紅作為(wei) pH指示劑,酸性培養(yang) 液呈橙黃色,堿性培養(yang) 液呈深紅色.

　　維生素

　　在細胞中,盡管血清是維生素重要來源, 但是許多培養(yang) 基中添加了各種維生素以適合更多的細胞係生長.