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elisa試劑盒揭示競爭法的操作步驟
更新時間:2014-09-09   點擊次數:893次

   競爭(zheng) 法可用於(yu) 測定抗原,也可用於(yu) 測定抗體(ti) 。以測定抗原為(wei) 例,受檢抗原和酶標抗原競爭(zheng) 與(yu) 固相抗體(ti) 結合,因此結合於(yu) 固相的酶標抗原量與(yu) 受檢抗原的量成反比。

操作步驟如下:

(1)將特異抗體(ti) 與(yu) 固相載體(ti) 連接,形成固相抗體(ti) 。洗滌。
(2)待測管中加受檢標本和一定量酶標抗原的混合溶液,使之與(yu) 固相抗體(ti) 反應。如受檢標本中無抗原,則酶標抗原能順利地與(yu) 固相抗體(ti) 結合。如受檢標本中含有抗原,則與(yu) 酶標抗原以同樣的機會(hui) 與(yu) 固相抗體(ti) 結合,競爭(zheng) 性地占去了酶標抗原與(yu) 固相載體(ti) 結合的機會(hui) ,使酶標抗原與(yu) 固相載體(ti) 的結合量減少。參考管中隻加酶標抗原,保溫後,酶標抗原與(yu) 固相抗體(ti) 的結合可達zui充分的量。洗滌。
(3)加底物顯色:參考管中由於(yu) 結合的酶標抗原zui多,故顏色zui深。參考管顏色深度與(yu) 待測管顏色深度之差,代表受檢標本抗原的量。待測管顏色越淡,表示標本中抗原含量越多。

原理
    ELISA是以免疫學反應為(wei) 基礎,將抗原、抗體(ti) 的特異性反應與(yu) 酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由於(yu) 抗原、抗體(ti) 的反應在一種固相載體(ti) ──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育後,可通過洗滌除去多餘(yu) 的遊離反應物,從(cong) 而保證試驗結果的特異性與(yu) 穩定性。在實際應用中,通過不同的設計,具體(ti) 的方法步驟可有多種。即:用於(yu) 檢測抗體(ti) 的間接法(圖a)、用於(yu) 檢測抗原的雙抗體(ti) 夾心法(圖b)以及用於(yu) 檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭(zheng) 法等等。比較常用的是ELISA雙抗體(ti) 夾心法及ELISA間接法。

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人組織蛋白酶抗體(ti) (Cath Ab)xl18luck新利    Human Cathepsin Antibodies,Cath Ab ELISA Kit    X33880
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人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體(ti) IgG(MPO-ANCA IgG)xl18luck新利    Human Mouse myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody IgG,MPO-ANCA IgG ELISA Kit    X33883
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人抗α-胞襯蛋白抗體(ti) IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)xl18luck新利    Human anti-alpha-Fodrin IgG/IgA,α-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit     X33885
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人抗雙鏈DNA抗體(ti) /天然DNA抗體(ti) (dsDNA)xl18luck新利    Human anti-double stranded DNA,dsDNA ELISA Kit    X33888
人抗核小體(ti) 抗體(ti) IgG(AnuA-IgG)xl18luck新利    human anti-nucleosome antibody IgG,AnuA-IgG ELISA Kit    X33889
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