1.:取處於(yu) 指數生長期、用較大瓶皿培養(yang) 的、80%~90%匯合單層培養(yang) 細胞。
2.加秋水仙素:使用zui終濃度為(wei) 0.02~0.8微克/毫升營養(yang) 液,溫箱繼續培養(yang) 6~10小時;或用低溫封閉法:把培養(yang) 細胞置於(yu) 4℃條件下6~12小時後,再於(yu) 37℃溫箱繼續培養(yang) 6~10小時處理(加秋水仙素)。
3.:可利用分裂中期細胞體(ti) 變圓與(yu) 底物附著不牢特點,此時手持培養(yang) 瓶,左右反複橫向水平搖動,令培養(yang) 液在培養(yang) 細胞表麵反複衝(chong) 刷。應用此法可使90%的中期分裂細胞從(cong) 瓶壁脫落,注意勿用力過猛,以防多量非分裂細胞脫落影響觀察。
4.離心:收集培養(yang) 液,1000轉/分鍾離心5~10分鍾。
5.:吸除上清液、加入預溫至37℃的0.075M KCl溶液,在溫箱中靜置20~30分鍾。
6.預固定:向懸液中加新鮮1:3醋酸、甲醇固定液1ml,用吸管吹打調勻,此措施能起到先使細胞表麵輕微固定,可防止固定後細胞粘連成塊。
7.固定:離心,同4,吸除上清液,加新鮮固定劑5~10ml;加固定劑時要用一手微斜持離心管,另手用吸管吸取固定劑,把固定劑逐滴滴在離心管壁上,使之慢慢流入離心管中,然後輕輕吹打均勻,置15~20分鍾。
8.重複7,末次離心後,小心吸除大部分上清,據懸液中細胞密度大小,餘(yu) 下固定液0.5~1ml。
9.製片:用滴片法製片,按如下步驟:*洗淨載物片,勿留任何油脂,置冰箱中儲(chu) 備備用。滴片前現從(cong) 冰箱中取出冷載物片1片,在載物片表麵出現細微水氣時,立即向片的一側(ce) 滴2~3滴細胞懸液,滴片時的距離能保持半米高度才好。滴片後置室溫中令其自然幹燥,或用吹風機熱風吹幹亦可。如此製備好的標本可置盒中備用或立即進行染色觀察。
10.:一般常用Giemsa染色:取幹液Giemsa 1份加pH6.8磷酸緩衝(chong) 液9份混合,染色10分鍾後,水洗、晾幹、可直接觀察。如標本需要保存或做長時間觀察,可過二甲苯兩(liang) 次後,用中性樹膠封片後,再過二甲苯,然後封片亦可。
553-24-2 3-butylpyridine N-甲基野靛堿
553-21-9 539-44-6 (1R)-1,2,3,4,5,6-hexahydro-1,5-methano-8H-pyrido[1,2-a][1,5]...
553-17-3 對甲基苯肼 486-87-3
553-12-8 p-tolylhydrazine α-萘乙酸鈉
553-03-7 539-47-9 (+)-alpha-isolupanine
552-94-3 3-(2-呋喃基)丙烯酸 487-06-9
552-89-6 Furylacrylic acid 5,7-二甲氧基香豆素
552-86-3 539-48-0 5,7-Dimethoxycoumarin
552846-17-0 對苯二甲胺 487-21-8
552-82-9 alpha,alpha'-diamino-P-xylene 2,4-二氧四氫喋啶
552-58-9 539-74-2 Lumazine
552-45-4 3-溴丙酸乙酯 507-28-8
552-41-0 Ethyl 3-bromopropionate 四苯基氯化砷鎓水合物
552-38-5 539-82-2 Tetraphenylarsonium chloride
552331-16-5 戊酸乙酯 507-52-8
552-32-9 Ethyl n-Valerate 2-三氟甲基-2-丙醇
552-30-7 539-86-6 1,1,1-trifluoro-2-methylpropan-2-ol
552-22-7 二烯丙基二硫 507-70-0
552-16-9 Allicin 龍腦
551-93-9 539-88-8 ((1S)-endo)-(-)-borneol
551-92-8 乙酰丙酸乙酯 508-02-1
551-62-2 Ethyl levulinate 齊墩果酸
551-16-6 539-90-2 oleanolic acid
551-15-5 丁酸異丁酯 508-75-8
551-11-1 isobutyl butyrate 鈴蘭(lan) 毒甙
551-06-4 540-07-8 convallatoxin
550-99-2 己酸戊酯 509-15-9
550-74-3 amyl caproate 鉤吻堿
550-44-7 540-09-0 gelsemine free base
550378-78-4 12-二十三酮 509-34-2
550378-39-7 tricosan-12-one 溶劑紅 49
550378-07-9 540-10-3 3',6'-bis(diethylamino)spiro[isobenzofuran-1(3H),9'-[9H]xant...
550363-85-4 鯨蠟 510-15-6
550347-54-1 hexadecyl palmitate 乙酯殺蟎醇
549-49-5 540-18-1 Chlorobenzilate
549-18-8 丁酸戊酯 511-08-0
548-93-6 amyl butyrate 麥角克堿
548-83-4 540-23-8 ergocristine
548-80-1 對甲苯胺,鹽酸鹽 511-45-5
548-73-2 p-Toluidine Hydrochloride 二苯呱丙醇