是一種分子量為(wei) 8～10kD的多肽，對嗜中性粒細胞，T淋巴細胞、嗜鹼性粒細胞具有趨化作用，並可激活嗜中性粒細胞，是一種重要的炎症介質。在嚴(yan) 重感染病人的血清中、炎症局部滲出液中都可檢測到高水平的IL-8。此外，近年來的研究表明，可能與(yu) 各種組織缺血後再灌注損傷(shang) 的發生有關(guan) 。研究人員采用兩(liang) 株自製的單克隆抗體(ti) 建立了夾心法ELISA用於(yu) 檢測IL-8，敏感性可達156Pg/ml。

相關(guan) 專(zhuan) 題ELISA免疫實驗技術
    是一種分子量為(wei) 8～10kD的多肽，對嗜中性粒細胞，T淋巴細胞、嗜鹼性粒細胞具有趨化作用，並可激活嗜中性粒細胞，是一種重要的炎症介質。在嚴(yan) 重感染病人的血清中、炎症局部滲出液中都可檢測到高水平的IL-8。此外，近年來的研究表明，IL-8可能與(yu) 各種組織缺血後再灌注損傷(shang) 的發生有關(guan) 。我們(men) 采用兩(liang) 株自製的單克隆抗體(ti) 建立了夾心法ELISA用於(yu) 檢測IL-8，敏感性可達156Pg/ml，操作簡單，重複性良好，可用於(yu) 的基礎和臨(lin) 床研究。
一、原理

    采用兩(liang) 株識別不同表位的抗IL-8單克隆抗體(ti) ，其中一株(4D7)作為(wei) 包被抗體(ti) ，以識別和結合待檢標本中的,另一株作為(wei) 酶標抗體(ti) ，與(yu) 結合於(yu) 包被抗體(ti) 的IL-8的另一個(ge) 表位結合並催化底物顯色。
二、試劑器材
    1. 試劑盒提供包被抗體(ti) 、酶標抗體(ti) 、標準品，底物(ABTS)、96孔elisa板。
    2. 包被緩衝(chong) 液、PBS、底物緩衝(chong) 液配製同常規ELISA法。
三、操作步驟：
    1. 包被：pH9.5 碳酸鹽緩液稀釋4D7單克隆抗體(ti) 粗提γ球蛋白至1μg/ml,加入96孔板,100μl/孔，放4℃,36小時。
    2. 封閉：0.1%吐溫PBS(Buffer A)衝(chong) 洗96孔板三次，加3%BSA Buffer A(Buffer B)200μl/孔，放37℃,1小時。
    3. 加待檢樣品：Buffer A 衝(chong) 洗96孔板三次，加待檢樣品及Buffer B 稀釋的標準品100μl/孔，放37℃,3小時。
    4. 加酶標抗體(ti) ：Buffer A衝(chong) 洗96孔板五次,3%PEG Buffer A稀釋酶標抗體(ti) 至1∶800，加入96孔板，100μl/孔，放37℃,1小時。
    5. 顯色：Buffer A衝(chong) 洗96孔板五次，pH5.4檸檬酸緩衝(chong) 液溶解底物(ABTS),0.2mg/ml,加3%H2O2,2μl/ml，加入96孔板，100μ/孔，室溫下或37℃顯色。
四、注意事項：
    1. 待檢標本如為(wei) 血清，應采用一次性容器，血液采集後盡快(6小時以內(nei) )分離血清。
    2. 封閉液或抗體(ti) 稀釋液應新鮮配製或凍存。