豬高鐵血紅蛋白xl18luck新利說明

用於(yu) 定量測定。測定的對象可以是抗體(ti) 也可以是抗原。

保存：2-8℃

主要用途：科研檢測xl18luck新利

樣本要求

1、樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因為(wei) 疊氮鈉（NaN3）是辣根過氧化物酶（HRP）的抑製劑。

2、標本采集後盡早進行提取，提取按相關(guan) 文獻進行，提取後應盡快進行實驗。若不能立即試驗，可將標本放於(yu) -20℃保存，但應避免反複凍融。

3、樣本應充分離心，不得有溶血及顆粒。

試驗時，注意事項如下：

1.正式試驗時，應分別以陽性對照與(yu) 陰性對照控製試驗條件，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。

2.在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:

（1）固相載體(ti) 的選擇：許多物質可作為(wei) 固相載體(ti) ，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體(ti) ，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據此判明其吸附性能是否良好。

（2）包被抗體(ti) （或抗原）的選擇：將抗體(ti) （或抗原）吸附在固相載體(ti) 表麵時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進行包被後，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對於(yu) 多數蛋白質來說通常為(wei) 1～10μg／ml。

（3）酶標記抗體(ti) 工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價(jia) 的滴定（見酶標記抗體(ti) 部份）。然後再固定其它條件或采取“方陣法"（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體(ti) 分別為(wei) 不同的稀釋度）在正式實驗係統裏準確地滴定其工作濃度。

（4）酶的底物及供氫體(ti) 的選擇：對供氫體(ti) 的選擇要求是價(jia) 廉、安全、有明顯地顯色反應，而本身無色。有些供氫體(ti) （如OPD等）有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體(ti) ，如TMB和ABTS是目前較為(wei) 滿意的供氫體(ti) 。底物作用一段時間後，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鍾為(wei) 宜。底物使用液必須新鮮配製，尤其是H2O2在臨(lin) 用前加入

豬高鐵血紅蛋白說明書(shu) 性能

1.靈敏度：zui小的檢測濃度小於(yu) 1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與(yu) 預期濃度相關(guan) 係數R值為(wei) 0.990。

2.特異性：不與(yu) 其它細胞因子反應。

3.重複性：板內(nei) 、板間變異係數均小於(yu) 10%。

結果判斷與(yu) 分析

1、儀(yi) 器值：於(yu) 波長450nm的酶標儀(yi) 上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為(wei) 縱坐標（Y），相應的IL-1標準品濃度為(wei) 橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的IL-1含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值範圍：0-800pg/ml

4、敏感度：1.0pg/ml