人促紅細胞生成素(EPO)試劑盒操作步驟說明

操作步驟：
1. 標準品的稀釋與(yu) 加樣：在酶標包被板上設標準品孔10 孔，在*、第二孔中分別加標準品100μl，然後在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然後從(cong) *孔、第二孔中各取100μl 分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然後在第三孔和第四孔中先各取50μl 棄掉，再各取50μl 分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻後從(cong) 第五、第六孔中各取50μl 分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻後從(cong) 第七、第八孔中分別取50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻後從(cong) 第九第十孔中各取50μl 棄掉。（稀釋後各孔加樣量都為(wei) 50μl，濃度分別為(wei) 180μg/L，120μg/L ，60μg/L，30μg/L， 15μg/L）。
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其餘(yu) 各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然後再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為(wei) 5 倍）。加樣將樣品加於(yu) 酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板後置37℃溫育30 分鍾。
4. 配液：將30（48T 的20 倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T 的20 倍）倍稀釋後備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體(ti) ，甩幹，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒後棄去，如此重複5 次，拍幹。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15 分鍾.
10.終止：人促紅細胞生成素EPO每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11.測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。測定應在加終止液後15 分鍾以內(nei) 進行。

注意事項：
1． 試劑盒從(cong) 冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30 分鍾後方可使用，酶標包被板開封後如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2． 濃洗滌液可能會(hui) 有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3． 各步加樣均應使用加樣器，並經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控製在5 分鍾內(nei) ，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線，做複孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD 值大於(yu) 標準品孔*孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n 倍）後再測定，計算時請zui後乘以總稀釋倍數（×n×5）。
5． 封板膜隻限一次性使用，以避免交叉汙染。
6． 底物請避光保存。
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7． 嚴(yan) 格按照說明書(shu) 的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀(yi) 讀數為(wei) 準.
8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳(chuan) 染物處理。
9． 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 人促紅細胞生成素EPO如與(yu) 英文說明書(shu) 有異，以英文說明書(shu) 為(wei) 準。

試劑盒性能：
1.樣品線性回歸與(yu) 預期濃度相關(guan) 係數R 值為(wei) 0.990 以上。
2.批內(nei) 與(yu) 批間應分別小於(yu) 9%和11%
檢測範圍：5IU/L– 15 IU/L
保存條件及有效期：
1.試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 個(ge) 月