PBS的清洗方式選擇、次數和時間的選擇？
 
單獨衝(chong) 洗，防止交叉反應造成汙染。
 
臨(lin) 床上每天檢測的病例很多，所用的抗體(ti) 種類及項目也多，如果在加入一抗孵育完後，將它們(men) 在一個(ge) 缸內(nei) 洗，這樣就會(hui) 造成交叉汙染，影響zui後的結果。正確的做法是單獨地進行衝(chong) 洗，衝(chong) 洗的PBS為(wei) 一次性，保證切片沒有相互交叉汙染的機會(hui) 。
 
溫柔衝(chong) 洗，防止切片的脫落。
 
衝(chong) 洗切片，取出切片，將PBS從(cong) 上輕輕地衝(chong) 洗，讓PBS自上而下流下來，不要拿起切片將PBS對準切片衝(chong) 洗，這樣由於(yu) 衝(chong) 出的PBS有一定的衝(chong) 擊力，很容易使切片周邊引起鬆動，導致切片的脫落。
 
衝(chong) 洗的時間要足夠，才能*洗去結合的物質。
 
注意：衝(chong) 洗切片有人提出用微振蕩器振染，振下未結合的各種物，使之不產(chan) 生背景，此種做法一是浪費時間，二是很容易導致切片的脫落。切片的衝(chong) 洗據實踐認為(wei) ，用一小燒杯柔和地於(yu) 切片上衝(chong) 洗，就能*衝(chong) 洗去未結合的物質，無需附加其它條件，衝(chong) 洗好於(yu) 切片上再注入PBS，持續2分鍾左右就*足夠了。
 
PBS的PH和離子強度的使用和要求。
 
劉彥仿指出：中性及弱鹼性條件（PH7－8）有利於(yu) 免疫複合物的形成，而酸性條件則有利於(yu) 分解；低離子強度有利於(yu) 免疫複合物的形成，而高離子強度則有利於(yu) 分解。［］免疫組化P56我們(men) 目前常用的PBS的PH在7.4-7.6濃度是0.01M，根據本室十幾年來的使用情況，認為(wei) 該溶液價(jia) 格便宜配製方麵，使用效果好。
 
常用試劑的配製和使用。
 
在免疫組織化學的染色過程中，用得zui多的試劑就是緩衝(chong) 液，因為(wei) 切片在整個(ge) 染色中，抗體(ti) 的加、換、切片的衝(chong) 洗，DAB的配製都離不開緩衝(chong) 液。可見緩衝(chong) 液在整個(ge) 染色中都起至關(guan) 鍵的作用，緩衝(chong) 液的過酸或偏堿，都將影響染色的結果。