外周血中存在幾種成熟的淋巴亞(ya) 群。78組成這些亞(ya) 群的有:具多種不同功能的胸腺淋巴(T)細胞;合成和分泌特異性抗體(ti) ,來源於(yu) 淋巴結的(B)淋巴細胞;null細胞(也叫第三群細胞),它參與(yu) 抗體(ti) 介導的細胞毒作用及自然細胞毒作用(自然殺傷(shang) 細胞)。這些亞(ya) 群是根據結合在細胞膜上的一個(ge) 或多個(ge) 糖蛋白而定義(yi) 的。根據簇設計和表達各種抗原的細胞類型,可以在附錄的CD分子表中,找到這些糖蛋白的列表。這些糖蛋白許多都被認為(wei) 對分子功能很重要。但在T淋巴細胞中,一個(ge) 單獨的細胞表麵糖蛋白的出現並不能說明細胞的功能特征。79.80例如,有些帶CD8標誌的T淋巴細胞是細胞毒細胞,其它的卻是抑製/效應細胞。帶CD4標誌的T淋巴細胞更異質:有些作為(wei) 誘導細胞促進效應細胞克隆的擴大;有些作為(wei) 輔助細胞,促進抗體(ti) 分泌性B淋巴細胞的生長;還有其它的作為(wei) 抑製/效應細胞或遲發性變態反應的效應因子。
細胞膜表麵糖蛋白很有用,因為(wei) 它使識別和計數具有不同功能的淋巴細胞亞(ya) 群成為(wei) 可能。但目前有關(guan) T淋巴細胞表麵糖蛋白的描述,通常都定義(yi) 了實行不止一種功能的亞(ya) 群。帶有某一特定糖蛋白標誌物的細胞數增加或減少,並不意味那些在體(ti) 內(nei) 隻實行某一特定功能。由於(yu) 這個(ge) 原因,淋巴細胞亞(ya) 群的計數結果與(yu) 疾病診斷或對治療的反應有經驗上的。而且,這些經驗上的關(guan) 聯,在臨(lin) 床上很有用。
計數血液中淋巴細胞亞(ya) 群的方法是以多克隆抗體(ti) 的提供為(wei) 基礎的,這些多克隆抗體(ti) 能識別單獨的細胞表麵糖蛋白。典型的操作是:將熒光標記的多克隆抗體(ti) 與(yu) 外周血一起孵育,然後在流式細胞儀(yi) 中計數反應細胞。流式細胞儀(yi) 是由一個(ge) 或多個(ge) 激光源、成像檢測器和細胞束(該細胞束能直接通過激光光路)產(chan) 生裝置構成的細胞分析儀(yi) 。用直角光散射,調節流式細胞儀(yi) ,可根據淋巴細胞的大小識別淋巴細胞,合適抗體(ti) 處理細胞後,用直接熒光計數帶有特異細胞表麵糖蛋白的淋巴細胞。通常用結合不同熒光的兩(liang) 種不同抗體(ti) 同時計數帶有特異性表麵糖蛋白的淋巴細胞,該技術叫熒光分析法,它用處很大。當定義(yi) 了更多的表麵標誌物的時候,就有可能鑒別和定量在體(ti) 內(nei) 僅(jin) 實行某一單獨功能的淋巴細胞亞(ya) 群。83而且,體(ti) 內(nei) 刺激細胞後,通過檢測細胞因子的合成,也能確定特異性的細胞亞(ya) 群在功能上是否完整。使用能通透細胞的試劑,然後用相應的單克隆抗體(ti) 染色,可檢測好幾種細胞因子(如腫瘤壞死因子,IL-2,γ幹擾素)。
淋巴細胞亞(ya) 群的計數,也叫T或B表麵標誌物的分析,由此得到不同類型的結果。每一種淋巴細胞亞(ya) 群的百分數和數,都應該與(yu) 健康個(ge) 體(ti) 的結果做對比。另外,在典型的分析中,應報告一型與(yu) 另一型(如輔佐/誘導,抑製/細胞毒細胞比率)的比率。