1.二抗與(yu) 組織中的Ig結合
如羊抗兔的二抗,二抗可以標本中(人)Ig發生交叉反應,科學上越接近的動物,交叉反應越明顯,如人與(yu) 猴,兔與(yu) 豚鼠。
避免方法:用與(yu) 待測組織相同的5%的正常血清稀釋二抗。如人血清。
組織中殘存醛基與(yu) Ig的結合
如醛類固定後未能*的衝(chong) 洗,殘留醛基可以和Ig結合。
2.避免方法:
(1)*衝(chong) 洗;
(2)0.02%的新鮮的硼氧化鉀液處理10分鍾後衝(chong) 洗。
3.內(nei) 源性過氧化物酶
紅細胞,粒細胞的含量尤其高,鏡下可以識別,不要將其當成陽性結果。
避免方法:
(1)石蠟切片 0.3%雙氧水-甲醇溶液處理切片;
(2)冰凍切片 3%雙氧水處理切片5分鍾(99:1)因為(wei) 未經固定包埋,大部分酶未被破壞;
(3)對於(yu) 骨髓塗片 用非過氧化物酶標記的
4.內(nei) 源性生物素
以 24mg/ml的卵白素封片15分鍾。
5.交叉反應
PcAb敏感性高,但特異性稍低,容易出現非特異性染色。
避免方法:
(1)盡可能稀釋;
(2)盡可能用McAb。