膠體(ti) 金免疫層析技術已其單份檢測、簡單快速、特異靈敏、無需輔助試劑和儀(yi) 器、肉眼觀察結果、結果可長期保存等特點,成為(wei) 當今zui快速靈敏方便的免疫學檢測技術之一,特別適用於(yu) 醫院、基層單位、野外作業(ye) 以及時間緊迫的檢查和大麵積普查。
隨著膠體(ti) 金層析技術的進步,膠體(ti) 金結合物的靈敏度逐步提高。目前,在大多數快速診斷分析中,檢測下限達到1ng/ml。如果采用高質量的,快速診斷分析檢測下限甚至可以達到10pg。隨著銀增強技術對檢測靈敏度的進一步提高,或許檢測靈敏度會(hui) 提高10-100倍。
膠體(ti) 金免疫層析檢測的底層一般是硝酸纖維素膜,在它上麵固定了檢測蛋白,通常是抗體(ti) 或抗原。連接著膜的是包含有幹燥金標的金標墊(通常是玻璃纖維)。在現有的大部分試紙條中,金標墊的金顆粒能特異性吸附於(yu) 檢測物的或抗原。樣品墊通常是紙,粘貼著金標墊。當液體(ti) 樣品用在樣品墊上,液體(ti) 由毛細作用力擴散通過金標墊,使幹燥金標複水並使得樣品中的分析物特異性作用於(yu) 金標。金標和分析物的複合物擴散到膜上,並向檢測蛋白移動,在那裏複合物被固定住,產(chan) 生清楚的信號——一條紅線。第二條線是控製線,在膜上由多餘(yu) 的金標記顯色形成,用於(yu) 表示檢測完成和質量控製。
在快速診斷應用的初期是用乳膠作為(wei) 標記物來產(chan) 生信號,現在仍有一些產(chan) 品使用這個(ge) 方法。過去和現在,乳膠法一直是凝集反應主要的標記方法,這是因為(wei) 它在結合成分的存在下易於(yu) 凝集。但對於(yu) 快速診斷試劑來說,標記物的穩定性對避免假陽性是非常重要的,因此易凝集的特性會(hui) 成為(wei) 大難題。因為(wei) 具有強潛在穩定性,金標記在80年代後期被引入到快速診斷試劑中。在合適的條件下,任何大小的金顆粒都可以。的高穩定性、高靈敏度、高精度和高可重複性使得金適合用於(yu) 在快速診斷試劑中性,降低金標的非特異性結合。當蛋白質和金顆粒正確連接時,蛋白質能牢固地結合在金顆粒表麵,無論是液態或固態都能保持長久的穩定。