一、培養(yang) 細胞的形態結構

    組織培養(yang) 細胞形態結構與(yu) 體(ti) 內(nei) 基本相同，但在大體(ti) 形態以及某些細微結構方麵仍存在著一定的差異。

(一)形態分類

    根據細胞是否貼附於(yu) 支持物上生長，形態有所不同。呈懸浮生長時，不論細胞原來源於(yu) 體(ti) 內(nei) 何種類型細胞．由於(yu) 生長在液體(ti) 環境中，胞體(ti) 基本呈圓形。大多數細胞是貼附型生長的。當細胞貼附在支持物上後，細胞分化現象常變得不顯著，易失去它們(men) 在體(ti) 內(nei) 時的原有特征．在形態上表現單一化的現象。貼附於(yu) 支持物表麵後，開始仍為(wei) 圓形，但為(wei) 時很短，很快便經過形態演變過渡成扁平形態。

1．成纖維細胞型：此細胞形態與(yu) 體(ti) 內(nei) 成纖維細胞的相似而得名，胞體(ti) 呈梭形或不規則三角形，中央有卵圓形核，胞質向外伸出2～3個(ge) 長短不齊的突起。細胞在生長時呈放射狀火焰狀或旋渦狀走行，除真正的成纖維細胞外，凡由中胚層間充質起源的組織，如心肌、平滑肌、成骨細胞、血管內(nei) 皮等細胞常呈此形態。

2．上皮組織型：本型細胞呈扁平不規則多角形，中有圓形核。細胞彼此緊密相連成單層膜，生長時呈膜狀移動；處於(yu) 上皮膜邊緣的細胞總與(yu) 膜相連，很少脫離細胞群單獨活動；起源於(yu) 內(nei) 、外胚層細胞如皮膚表層、消化層上皮、肝、胰、肺泡上皮等皆呈上皮型形態。

3．遊走細胞型：此型細胞在支持物上散在生長，一般不連接成片，細胞質經常伸出偽(wei) 足或突起，呈活躍地遊走或變形運動。此型細胞不很穩定．有時亦難和其他型細胞相區別，在一定條件下，如培養(yang) 基化學性質變動等，它們(men) 也可能呈成纖維細胞形態。

4．多形細胞型：有一些組織和細胞，如神經組織的細胞等，難以確定它們(men) 規律和穩定的形態，可通歸人多形細胞型。

(二)顯措絲(si) 袖

    在一般光學顯微鏡下直接觀察體(ti) 外培養(yang) 健康活時，細胞是均質而透明的，結構極不明顯。隻有用相差顯微鏡才能看清細胞輪廓和內(nei) 部結構。培養(yang) 中細胞一般有1～2個(ge) 核仁。用固定染色法和特殊技術可顯示出細胞器等結構，但在生活時的細胞中卻不易觀察到。在細如機能狀態不良時，細胞輪廓會(hui) 增強，反差增大。在胞質中時而出現顆粒、脂滴和空泡等，是細胞代謝不良的表現；反差很大的暗色小顆粒是變形的線粒體(ti) 。細胞形態結構與(yu) 細胞在體(ti) 外生存時間的長短、細胞種類等有直接關(guan) 係。初代培養(yang) 的正常二倍體(ti) 細胞，除大體(ti) 形態外．在構造和生物學性狀上與(yu) 原體(ti) 內(nei) 細胞近似性大，細胞均質性和透明度都很強。隨細胞在體(ti) 外生活時間的延長和反複傳(chuan) 代。正常二倍體(ti) 細胞會(hui) 發生一定的變化。其核型發生變化時．則產(chan) 生多倍體(ti) 或異倍體(ti) 細胞。形態上輪廓增強、核仁增多、有時出現雙核或多核巨細胞等。如細胞發生轉化，它們(men) 的形態發生的變化更大。

    培養(yang) 細胞形態學上的特征隻可以在接種對象明確的情況下，大致表明出細胞的類型。如果要確認培養(yang) 物細胞的種類，必須借助特異性的鑒別方法加以識別。常用細胞的某種特異性蛋白質或肽的抗體(ti) 進行免疫細胞化學染色鑒定。

(三)超微結構

    透射電鏡下，一般看不到培養(yang) 細胞與(yu) 體(ti) 內(nei) 的細胞形態結構方麵的明顯差異。培養(yang) 細胞膜亦分為(wei) 三層結構，總厚度約7．5nm，由雙層類脂分子組成，雙層分子間嵌有蛋白質分子。細胞膜向外凸出形成泡狀、葉狀、絲(si) 狀和指狀突起，長度比較一致，稱微絨毛。隨細胞類型、正常或異常(腫瘤細胞)，以及處於(yu) 周期階段不同，微絨毛的形狀和數量均有差別。細胞間存在著一定的間隙，成纖維細胞之間的間隙不恒定，上皮細胞相互之間一般有1.5～15nm的間隙。細胞相互接觸部並可見到橋粒(desmcsome)。細胞膜表麵常附有由細胞分泌形成的糖蛋白膜，即細胞外衣。在細胞膜下麵有一層厚100～500n。m的胞質區，稱為(wei) 膜下皮質層，該層具有中等電子密度，其中常見有直徑5～7nm的微絲(si) 。微絲(si) 在膜下皮質層中分布甚廣，它們(men) 主要由多聚肌纖蛋白組成。線粒體(ti) 、內(nei) 質網、高爾基氏複合體(ti) 、中心體(ti) 和溶酶體(ti) 等多集中在細胞質內(nei) ，它們(men) 的形態結構與(yu) 體(ti) 內(nei) 細胞相似，但常隨細胞生長狀態不同有很大變化。細胞核超微結構與(yu) 體(ti) 內(nei) 無大差別。永生性細胞係和腫瘤細胞的細胞核一般比較大，染色質比較豐(feng) 富，核仁大而多。